[发明专利]近红外光谱测定复方苦参注射液渗漉过程多种成分含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药生产质量控制技术领域，涉及以近红外光谱测定成分含量的方法，具体地说是一种基于近红外光谱快速测定复方苦参注射液渗漉过程多种成分含量的方法。

背景技术

复方苦参注射液是由苦参和白土茯苓精制而成的纯中药制剂，具有抗癌、增强免疫、止血、止痛、抗肿瘤等功效，其主要成分为苦参碱、槐定碱及氧化苦参碱等生物碱类成分。部颁标准采用酸碱滴定法测定复方苦参注射液中总生物碱含量，而目前关于苦参及其制剂中生物碱类成分含量的测定方法仅见以薄层色谱扫描法和高效液相色谱法测定苦参碱的报道。这些方法操作繁琐、耗时、准确性不高，远远不能满足苦参制剂生产过程中多种成分的快速实时监测要求，严重阻碍了中药的产业化发展。因此，迫切需要发展一种快速分析方法，对中药生产过程进行实时监控，以便及时发现和解决问题，保证产品质量。

提取过程是中药生产的关键环节，溶剂提取法是最为常见的提取方式，常用的溶剂提取法有浸渍法、渗漉法、煎煮法、同流法及连续回流提取法等。其中，渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断添加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉器下部流出浸液的一种浸出方法。当溶剂渗进药粉，溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，其浸出效果优于浸渍法。当渗滴液颜色极浅，或渗漉液的体积相当于原药材重量的10倍时，便可认为基本上提取完全。复方苦参注射剂采用1%醋酸液作溶剂，浸渍后进行渗漉，从而提取出大量的生物碱和黄酮类物质。渗漉过程中多种成分含量如何变化，以及如何判断完全提取终点是实际生产急需解决的问题，而解决此问题需要先建立一种快速测定提取过程中多种成分含量的方法。

近红外光谱（Near-Infrared Spectroscopy,NIRS）是可见光与中红外光谱之间的一段谱区，波长范围780nm-2526nm（12820cm^-1-3958cm^-1）。该段光谱区主要是含氢基团（C-H、N-H、O-H）的倍频与合频吸收。与其他光谱技术相比，近红外光谱具有吸收弱的特点，因此，使得样品不需要稀释等预处理，就可直接进行分析。该技术近年来随化学计量学而发展迅速，在石油化工、食品、药物等领域得到了很好的运用。这为我们将该技术用于中药制剂生产过程多种成分实时分析和监控成为一种可能。

发明内容

本发明的目的在于针对复方苦参注射液生产过程缺少有效的质量分析与控制技术，提供一种近红外光谱测定复方苦参注射液渗漉过程多种成分含量的方法，以有效满足复方苦参注射液生产过程中多种成分含量快速测定的需求，保证最终产品质量。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

（1）建立校正模型，收集具有代表性的苦参和白土茯苓药材渗漉液作为校正样本集，以传统分析方法测得渗漉液中多种成分的含量作为参考值，同时使用近红外光谱仪采集得到校正样本集相应的近红外光谱图，选择合适的光谱波段和预处理方法，使用偏最小二乘法，建立被测样品中多种成分含量与特征光谱之间关系的数学模型；

（2）对建立的校正模型进行外部验证：取已知多种成分含量的苦参和白土茯苓药材渗漉液样品，在步骤（1）相同条件下测定其近红外吸收光谱，根据步骤（1）建立的数学模型计算样品中多种成分的含量预测值，并与已知含量进行比较，预测值的标准误差均值低于20%；

（3）校正模型的应用：按同样方法扫描得到待测样品的近红外光谱图，选用同样的光谱波段和预处理方法，将特征光谱信息输入步骤（1）建立的数学模型，计算预测出苦参和白土茯苓药材渗漉液中多种成分的含量。

其中，所述苦参和白土茯苓药材渗漉液中的多种成分含量包括氧化苦参碱、氧化槐果碱、黄酮三叶豆紫檀苷、总糖含量以及含固量。

所述校正样本集的收集方法是取不同批号的苦参和白土茯苓药材，按照苦参∶白土茯苓＝7∶3的重量比混合，粉碎成0.2mm-0.81mm的粗粉，加入粗粉重量10-15倍体积的1wt%醋酸水溶液，浸泡24h后，装入渗漉装置中，压实，以粗粉重量5-10倍的1wt%醋酸水溶液为漉液进行渗漉，渗漉时间24h，流速0.5ml/min，每隔一段时间收集样品，确保样品各成分含量分布具有一定的范围。

同时，校正样本集在采集光谱前需要先进行样品的前处理：将样品以四层滤纸过滤，于1000-1200rmp离心5-15min，取上清液进行光谱采集和含量测定。

本发明中，校正样本集中多种成分含量的测定方法分别是：

（1）采用HPLC法测定氧化苦参碱和氧化槐果碱含量：