[发明专利]一种清开灵注射液的定量检测方法

权利要求书

1.一种清开灵注射液的定量检测方法，其特征在于用高效液相色谱法测定清开灵注射液中的氨基酸的含量，其中：

(a)色谱条件：氨基酸分析柱，流动相A为40mmol/L Na₂HPO₄溶液，流动相B为按照体积比为45∶45∶10的乙腈-甲醇-水；流速为每分钟2.0ml；梯度洗脱：0～1.9min，100％A相，18.1～18.5min，43％A相+57％B相，18.6～22.3min，100％B相，23.2～26min，100％A相；检测波长为338nm和262nm，柱温40℃；

(b)被测样品溶液：精密量取清开灵注射液1ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度；

(c)对照品溶液：称取谷氨酰胺、天门冬酰胺、色氨酸、正缬氨酸、肌氨酸、羟脯氨酸六种补充氨基酸各0.25mmol，置10ml量瓶中，加纯化水稀释至刻度，振摇使溶解，得补充氨基酸储备液；取20μl补充氨基酸储备液加入2ml 17种氨基酸溶液中混合，即得浓度约250pmol/μl的混合氨基酸对照品溶液；

(d)测定法：分别取被测样品溶液、邻苯二甲醛、9-芴甲基氯甲酸酯各0.5μl、硼酸缓冲液2.5μl，置自动进样瓶中，自动进样测定；记录对照品、被测样品的色谱图，按外标法以峰面积计算。

2.根据权利要求1所述的清开灵注射液的定量检测方法，其特征在于所说的自动进样的程序为：

(1)从硼酸盐缓冲液中吸取2.5μl，吸取0.5μl样品；

(2)“在空气中”混合3μl，最大速度，2次；

(3)等待0.5分钟；

(4)从未加盖的水瓶中吸取0μl，清洗针头；

(5)从磷苯二甲醛瓶中吸取0.5μl；

(6)“在空气中”混合3μl，最大速度，6次；

(7)从未加盖的水瓶中吸取0μl，清洗针头；

(8)从9-芴甲基氯甲酸酯瓶中吸取0.5μl；

(9)“在空气中”混合4μl，最大速度，6次；

(10)从水瓶中吸取32μl；

(11)“在空气中”混合18μl，最大速度，2次；

(12)进样。