[发明专利]一种精浆果糖浓度检测试剂盒及应用

权利要求书

1.一种精浆果糖浓度定量检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂和果糖标准液，其中，

1)R1试剂包括以下含量的组份：

pH4.5-5.0缓冲液        150-300μmol/L；

显色剂                 50-70μmol/L；

电子受体               285-300μmol/L；

防腐剂                 0.01-0.1％；

2)R2试剂包括以下含量的组份：

pH4.5-5.0缓冲液        150-300μmol/L；

果糖脱氢酶             2.5-6.0U/ml；

防腐剂                 0.01-0.1％；

3)果糖标准液包括以下含量的组份：

pH4.5-5.0缓冲液        150-300μmol/L；

果糖                   20-60mmol/L；

防腐剂                 0.01-0.1％；

其中：所述缓冲液为pH4.5-5.0的McIlvaine′s缓冲液、Walpole′s缓冲液或磷酸钾缓冲液；

所述显色剂为噻唑蓝、碘硝基四唑紫或1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐；

所述电子受体为吩嗪二甲酯硫酸盐或1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐；

所述防腐剂为叠氮钠、庆大霉素或ProClin系列防腐剂中的任意一种。

2.权利要求1所述的精浆果糖浓度定量检测试剂盒在检测精浆果糖浓度中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于包括以下步骤：

1)样品制备：新鲜精液液化后通过3000～5000rpm离心10～20min，所获得的上清液即是；

2)在全自动生化仪的操作软件上输入基本参数如下：

检测项目：Fru；

样品试剂比：1∶30；

试剂比：R1∶R2＝1∶4；

主波长：560-590nm；

检测方法：速率法；

定标方法：单点定标或两点定标；

反应方向：上升；

反应时间：180-270秒；

检测时间：90-120秒；

3)定标操作：用果糖标准液进行定标，仪器会根据果糖标准液的浓度及其每分钟吸光度变化率，得出一个果糖浓度和吸光度变化率之间的关系式：

单点定标：Y＝AX；或两点定标：Y＝AX+B，

其中，单点定标的常数A或两点定标的常数A、B在定标结束后自动给出，Y代表果糖标准液的浓度，X代表果糖标准液的每分钟吸光度变化率；

4)样本检测：

将1)中制备好的样本和R1试剂、R2试剂放在全自动生化仪的相应位置上，输入样本的检测信息后，开始检测；测试结束后，仪器根据定标得出的浓度和吸光度变化率之间的关系式自动计算出样本中果糖的浓度。