[发明专利]截短的IP3受体V33K-NT及其应用无效
| 申请号： | 201110242128.5 | 申请日： | 2011-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN102286094A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 丁兆 | 申请（专利权）人： | 四川汇宇制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/705 | 分类号： | C07K14/705;G01N21/64 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人： | 谭新民;梁田 |
| 地址： | 641000 四川省内*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ip sub 受体 v33k nt 及其 应用 | ||
1.截短的IP3受体V33K-NT，为IP3R1的N末端1-604残基的突变体，所述突变体的序列具有序列表中SEQ ID NO:3所述的氨基酸序列，其特征在于，其33位氨基酸是由缬氨酸突变为赖氨酸。
2.如权利要求1所述的一种截短的IP3受体V33K-NT的应用，其特征在于，所述截短的IP3受体V33K-NT用于IP3R靶向药物的筛选。
3.如权利要求1所述的一种截短的IP3受体V33K-NT的应用，其特征在于，所述截短的IP3受体V33K-NT用于IP3R靶向药物的筛选时，包括以下步骤：
A.提供荧光标记配体、作为竞争配体的待测化合物、以及3种包含IP3结合结构域的受体多肽；分别为受体IBC、受体NT和所述截短的IP3受体V33K-NT；所述受体IBC是位于IP3R受体224-604位的IP3结合中心，所述受体NT是野生型的位于IP3R受体1-604 位的IP3受体N末端片段；
B．竞争结合分析实验：将所述步骤A中的荧光标记配体、待测化合物、至少一种受体多肽置于容器内混合；
C．通过荧光偏振技术测定所述步骤B的容器在不同温度下对应的荧光各向异性度A，计算对应温度下待测化合物与相应受体多肽竞争结合时的平衡解离常数KD值，根据平衡解离常数KD值计算得到相应温度下的焓变ΔH，每种受体的焓变ΔH分别表示为ΔH IBC、ΔHNT 和ΔHV33K；
D.计算ΔH IBC与ΔHNT的差值，ΔH IBC与ΔHNT的差值用Δ（ΔH IBC -NT）表示，Δ（ΔH IBC -NT）的绝对值越小，则待测化合物的药效越强；或者计算ΔHV33K和ΔHNT的差值，ΔHV33K和ΔHNT的差值用Δ（ΔHV33K-NT）表示，Δ（ΔHV33K-NT）的绝对值越大，则待测化合物的药效越强。
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