[发明专利]甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂有关物质检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂的检测方法，特别甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂有关物质的检测方法。 

背景技术：

甲泼尼龙，具有抗炎、抗过敏、抗风湿、免疫抑制作用，广泛的用于治疗过敏性与自身免疫性炎症性疾病，如结缔组织病、活动性风湿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、严重支气管哮喘、严重皮炎、溃疡性结肠炎、急性白血病等，也用于某些严重感染及中毒、恶性淋巴瘤的综合治疗。由于其为难溶的有机化合物，因此为了便于制备成注射剂，可以制备成为易溶于水的盐，如甲泼尼龙琥珀酸钠。中国专利CN200610076703.8提供了一种甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂，但并未公开其质量检测方法，并且目前关于注射用甲泼尼龙琥珀酸钠的国家药品标准WS₁-(X-520)-2003Z中，只规定了采用内标法检测含量和游离甲泼尼龙的方法，也没有规定对有关物质的检测方法，但随着对我国对药品质量控制工作要求的提高，建立有关物质的标准和检测方法成为提高和更好的控制甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂质量的迫切需要。而经过我们实验发现，现在的含量和游离甲泼尼龙检测方法，无法有效分离全部杂质，并不适用于检测有关物质。 

发明内容

我们提供了一种甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂有关物质检测方法， 

一种甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂有关物质检测方法，采用高效液相色谱法进行检测 

色谱条件为：色谱柱选用硅胶为固定相；体积比为130∶130∶14∶7∶6的氯代正丁烷-水饱和氯代正丁烷-四氢呋喃-甲醇-冰醋酸为流动相；检测波长为254nm。 

所述的有关物质检测方法，所述色谱条件还包括： 

流动相流速：0.5-1.5ml/min 

柱温：20-40℃； 

进样量：5-50μL； 

进样样品浓度：0.1-0.5mg(以甲泼尼龙计)。 

优选， 

流动相流速：1.0ml/min； 

柱温：20-30℃； 

进样量：20μL； 

进样样品浓度：0.25mg/ml(以甲泼尼龙计)。 

所述的有关物质检测方法，其特征是检测时操作方法如下： 

对照品溶液的配制精密称取琥珀酸甲泼尼龙14-17mg，置50ml量瓶中，加四氢呋喃5ml，加含3％冰醋酸(体积百分比)的氯仿使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加3％冰醋酸(体积百分比)的氯仿溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 

供试品溶液的配制精密取甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂，用水配制成为甲泼尼龙琥珀酸 钠浓度4-6mg/ml的溶液，精密量取5ml，置分液漏斗中，加水10ml，加四氢呋喃10ml，用3％冰醋酸的氯仿溶液提取三次，每次20ml，用脱脂棉加无水硫酸钠滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加3％冰醋酸的氯仿溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 

测定法量取对照品溶液20μl，注入液相色谱仪。再量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。 

本发明提供的甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂有关物质检测方法，与现有的甲泼尼龙琥珀酸钠含量检测方法用于检测有关物质时相比，调整了氯代正丁烷-水饱和氯代正丁烷的含量，成功的将用现有方法无法与主成分峰分开的杂质峰A与主成分峰分离(见图2)。并且，对保留时间主成分峰之前出现的杂质，分离效果也好于现有方法，通过图1和图2对可以看出，图2保留时间在主成分峰之前分离出的杂质峰多于图1。 

附图说明

图1是检测方法实施例1的HPLC图谱 

图2是检测方法实施例2的HPLC图谱 

具体实施方式：

供试品 

市售甲泼尼龙琥珀酸钠冻干粉针剂 

商品名：甲强龙(Pfizer Manufacturing Belgium NV生产) 

规格：40mg/瓶(以甲泼尼龙计)辅料为磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、乳糖 

检测仪器 

Agilent 1200型高效液相色谱仪 

检测器Agilent G1365B型多波长紫外检测器 

色谱柱ZORBAX SIL(硅胶为固定相)，No.880952-701 4.6×250mm，5μm， 

甲醇、氯代正丁烷为色谱纯，四氢呋喃、冰醋酸、氯仿为分析纯，水为经抽滤的去离子水。 

检测方法实施例1，