[发明专利]一种高纯度棘白菌素B的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度棘白菌素B的制备方法，包括下述步骤：

1)棘白菌素B发酵液固液分离，得到固形发酵培养物；

2)在固形发酵培养物中加入极性溶剂浸泡；

3)浸泡液固液分离，得到棘白菌素B提取液；

4)将提取液极性溶剂浓度调低，导入大孔吸附树脂进行富集；

5)吸附完毕，用极性溶剂洗涤树脂，然后用解吸剂进行解吸；

6)加入脱色物质对解吸液脱色，搅拌均匀后过滤；

7)脱色液浓缩、加入极性溶剂萃取、结晶得棘白菌素B粗提物；

8)粗提物经Fraclite800层析分离，利用层析溶剂洗脱，得到棘白菌素B湿粉；

9)棘白菌素B湿粉经真空干燥，得到高纯度的棘白菌素B产品。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤2)极性溶剂为乙醇或甲醇，浓度为70-90％，加入量为每千克固形发酵培养物2-6升。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤4)极性溶剂浓度调低至30-40％。

4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤4)大孔吸附树脂为HZ816、HZ830、DA201树脂中的一种，树脂的用量为棘白菌素B提取液体积的1/10-1/33。

5.根据权利要求1所述的方法，其中步骤5)中极性溶剂为30-50％的乙醇，解吸剂为70-90％的乙醇。

6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤6)中脱色物质为活性炭，加入量为解吸液体积的0.5-2％。

7.根据权利要求1所述的方法，其中步骤7)萃取所用极性溶剂为乙酸乙酯。

8.根据权利要求1所述的方法，其中步骤7)的结晶用极性溶剂为丙酮、异丙醇或石油醚中的一种。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤8)中的层析分离时层析溶剂为甲醇-水、乙醇-水或丙酮-水中的一种。

10.根据权利要求1所述的方法，其中步骤9)中真空干燥条件为在40-50℃条件下干燥24小时。