[发明专利]拟穴青蟹阴离子抗菌肽的毕赤酵母表达产物及其制备方法

权利要求书

1.拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的基因序列为：

ggccaggcac tcaacaaact tatgcctaaa atcgtcagcg ccataattta tatggtcggg    60

caacccaatg caggtgtcac ttttctgggc caccaatgtc tggtggagtc aacgaggcaa    120

ccagacgggt tttacaccgc aaagatgtcg tgtgcttcct ggactcatga taatcctatt    180

gttggggaag gaagaagccg ggttgaactt gaggcgctta aaggttccat cacaaacttt    240

gtccagacag catccaatta caagaagttc accatagatg aggtcgagga ctggattgct    300

tcttac                                                               306。

2.拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的氨基酸序列为：

Gly Gln Ala Leu Asn Lys Leu Met Pro Lys Ile Val Ser Ala Ile Ile

1               5               10                      15

Tyr Met Val Gly Gln Pro Asn Ala Gly Val Thr Phe Leu Gly His Gln

            20                  25                      30

Cys Leu Val Glu Ser Thr Arg Gln Pro Asp Gly Phe Tyr Thr Ala Lys

        35                  40                  45

Met Ser Cys Ala Ser Trp Thr His Asp Asn Pro Ile Val Gly Glu Gly

    50                  55                  60

Arg Ser Arg Val Glu Leu Glu Ala Leu Lys Gly Ser Ile Thr Asn Phe

65                  70                  75                  80

Val Gln Thr Ala Ser Asn Tyr Lys Lys Phe Thr Ile Asp Glu Val Glu

                85                  90                  95

Asp Trp Ile Ala Ser Tyr

           100。

3.拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)构建拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的重组表达载体；

2)将步骤1)所得重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；

3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin。

4.如权利要求3所述的拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述表达载体选用pPIC9K。

5.如权利要求3所述的拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述宿主细胞为毕赤酵母GS115菌株。

6.如权利要求3所述的拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述分离纯化的方法为先将表达产物进行离心，收集发酵上清液，透析后，再进行亲和层析。

7.真核表达的抗菌肽Scygonadin在制备抗病原微生物药物中的应用。

8.真核表达的抗菌肽Scygonadin在制备动物饲料添加剂中的应用。