[发明专利]一种评价HER2靶位治疗药物及手段的体外检测方法

权利要求书

1.一种评价HER2靶位治疗药物及手段的体外检测方法，包括下列步骤：

a 取对数生长期表达HER2的细胞经酶消化后，用完全培养基制成细胞悬液，计数并计算细胞密度及活率，调整活细胞密度为n×10⁵个/ml，将细胞悬液等体积加入细胞培养板孔中，同时设立空白对照孔，空白对照孔被加入等体积完全培养基，然后将细胞培养板置于37℃、5％二氧化碳培养箱中培养过夜；

b 取对照品及待测样品，用完全培养基进行系列梯度稀释，得到系列稀释浓度的对照品及待测样品；

c 取步骤a的细胞培养板，除去上清。

d 将系列稀释浓度的对照品及待测样品以等体积依次加入步骤a所述细胞培养板孔中，空白对照孔则加入等体积的完全培养基，然后将细胞培养板放置于37℃、5％二氧化碳培养箱中培养72-74h；

e 采用检测活细胞或死细胞量的检测体系对细胞培养板进行显色反应；

f 显色反应完成后，测定显色反应的结果，并根据测定结果计算待测样品的细胞增殖抑制生物活性。

2.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述HER2靶位治疗药物是单克隆抗体、激酶抑制剂、反义寡核苷酸、化合物、中药提取物或中药复方提取物中之一或它们的任何组合。

3.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述n＝1-3。

4.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述对数生长期表达HER2的细胞是人乳腺腺癌细胞SK-BR-3或人乳腺导管癌细胞BT-474。

5.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述对数生长期表达HER2的细胞是人乳腺导管癌细胞BT-474。

6.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述完全培养基是含10％FBS的RPMI1640完全培养基。

7.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述系列梯度稀释是2倍系列梯度稀释。

8.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于在步骤e中，所述检测活细胞或死细胞量的检测体系包括四唑类化合物氧化还原检测体系、ATP总量检测体系或LDH释放量检测体系等。

9.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述四唑类化合物为MTT、MTS或CCK-8。

10.如权利要求1所述的体外检测方法，其特征在于所述细胞培养板为96孔细胞培养板。