[发明专利]山羊绒和绵羊毛的实时荧光PCR鉴别方法无效
| 申请号： | 201110254979.1 | 申请日： | 2011-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN102304579A | 公开（公告）日： | 2012-01-04 |
| 发明（设计）人： | 邵碧英;林志武;陈文炳;缪婷玉;彭娟 | 申请（专利权）人： | 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350003 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 山羊绒 绵羊 实时 荧光 pcr 鉴别方法 | ||
1.一种山羊绒和绵羊毛的实时荧光PCR鉴别方法，其特征在于：所述方法包括：提取样品DNA；针对山羊、绵羊的线粒体DNA序列设计引物和探针；通过实时荧光PCR，对DNA中的山羊成分、绵羊成分分别进行特异性扩增；根据扩增曲线和Ct值鉴别待测样品中是否含有山羊绒、绵羊毛。
2.根据权利要求1所述的山羊绒和绵羊毛的实时荧光PCR鉴别方法，其特征在于：用于鉴别山羊绒的引物、探针为：12SG-F：5’-CGC CCT CCA AAT CAA TAA-3’、12SG-R：5’-CTA TAG TGT ATC AGC TGC A-3’、12SG-P：5’-FAM-AAA CGT GTT AAA GCA CTA CAT C-TAMARA-3’；用于鉴别绵羊毛的引物、探针为：12SS-F：5’-ATA TCA ACC ACA CGA GAG GAG AC-3’、12SS-R：5’-TAA ACT GGA GAG TGG GAG A-3’、12SS-P：5’-FAM-ACT AAT CCT CAT CCT CAT GC-TAMARA-3’。
3.根据权利要求2所述的山羊绒和绵羊毛的实时荧光PCR鉴别方法，其特征在于：所述PCR反应体系为：2×Premix Ex TaqTM 12.5μL，50×ROX Reference Dye Ⅱ0.5 μL，10 μmol/L引物、探针各0.75μL，DNA模板5 μL，ddH2O 4.75μL；鉴别山羊绒的PCR反应条件为：95 ℃，30 s；95 ℃，5 s，54 ℃，35 s，40个循环；鉴别绵羊毛的PCR反应条件为：95 ℃，30 s；95 ℃，5 s，52 ℃，35 s，40个循环。
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