[发明专利]检测玉米赤霉烯酮药物的酶联免疫试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测玉米赤霉烯酮的酶联免疫试剂盒，包括包被原和酶标记物，所述包被原选自玉米赤霉烯酮半抗原与载体蛋白的偶联物、玉米赤霉烯酮抗体和抗抗体；当所述包被原为玉米赤霉烯酮半抗原与载体蛋白的偶联物时，所述酶标记物为酶标抗抗体；当所述包被原为玉米赤霉烯酮抗体时，所述酶标记物为酶标半抗原与载体蛋白的偶联物；当所述包被原为抗抗体时，所述酶标记物为酶标玉米赤霉烯酮半抗原与载体蛋白的偶联物；所述玉米赤霉烯酮半抗原是将玉米赤霉烯酮和盐酸羟胺缩合反应，再与琥珀酸酐通过缩合反应得到的。

2.根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述玉米赤霉烯酮抗体为玉米赤霉烯酮单克隆抗体，是以玉米赤霉烯酮半抗原与载体蛋白的偶联物作为免疫原得到的；所述载体蛋白为卵清蛋白、牛血清蛋白、鼠血清蛋白、甲状腺蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、血蓝蛋白或纤维蛋白原。

3.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述玉米赤霉烯酮单克隆抗体由杂交瘤细胞株D-2-3CGMCC No.5128分泌产生。

4.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述酶标记物的标记酶为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酯酶。

5.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体。

6.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括玉米赤霉烯酮标准溶液、显色液、浓缩洗涤液、终止液；所述浓缩洗涤液为pH值为7.2-7.5、含有0.8-1.2％吐温-20、0.3-0.6‰叠氮化钠的0.1-0.2mol/L的磷酸盐缓冲液；所述底物显色液由显色液A液和显色液B液组成，显色液A液为过氧化氢或过氧化脲，显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺；所述终止液为1～2mol/L硫酸或盐酸溶液；所述包被缓冲液为pH值为8.7-9.2、0.1-0.2mol/L的硼酸缓冲液；所述封闭液为含有5-8％小牛血清和0.03-0.07‰叠氮化钠、pH值7.2-7.4、0.05-0.1mol/L的磷酸盐缓冲液，所述百分比为重量体积比。

7.根据权利要求4所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于当标记酶为辣根过氧化物酶时，所述显色剂由显色液A液和显色液B液组成，显色液A液为过氧化氢或过氧化脲，显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺，终止液为1～2mol/L硫酸或盐酸溶液；当标记酶为碱性磷酸酯酶时，显色剂为硝基磷酸盐缓冲液，终止液为1～2mol/L氢氧化钠溶液。

8.一种检测玉米赤霉烯酮的方法，包括以下步骤；

(1)样品前处理；

(2)用权利要求1-7任一项所述的酶联免疫试剂盒检测；

(3)分析检测结果；

9.保藏号为CGMCC No.5128的玉米赤霉烯酮单克隆抗体杂交瘤细胞株D-2-3。