[发明专利]一种抗菌肽缓释微球制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗菌肽微球制剂及其制备方法，尤其涉及一种用于非静脉给药的长效抗菌肽缓释微球制剂及其制备方法。

背景技术

抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽，广泛存在于生物界，是先天免疫的重要防御成分，其杀细胞机制为在靶细胞膜上穿孔，靶细胞因渗透压改变而死亡。抗菌肽具有广谱抗菌活性，并不易产生耐药性，有良好的应用前景。但是抗菌肽在体内容易被蛋白酶降解，体内循环半衰期短，患者需要频繁给药，不仅给患者带来了较大的经济负担，还给患者带来了给药痛苦。因此，研究抗菌肽长效缓释制剂具有重要的意义。

近年来，生物可降解的高分子材料广泛应用于蛋白质多肽类药物长效缓释微球的制备，其中聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA），由于其良好的生物相容性和可生物降解性，已被美国FDA批准为药用高分子辅料使用。以生物可降解材料作载体的缓释微球注射制剂，顺应了制剂学向长效、高效、低毒发展的方向，已成为三十年来药剂学研究的一个热点。它具有以下优点：①与普通注射剂相比，长效注射微球显著延长给药间隔，大大提高了病人用药的依从性。②可以持续维持最低有效浓度，因而可以减少总的给药剂量，减轻某些副作用。③生物可降解微球注射剂不需手术植入，仅肌肉注射，释药后载体可生物降解，其降解物被机体吸收，克服了以往植入剂使用上的不便，为患者提供了一种很好的给药方式。

发明内容

本发明的目的是提供一种含抗菌肽的可生物降解缓释微球，同时还提供一种制备所述含抗菌肽的可生物降解长效缓释微球的方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种抗菌肽缓释微球制剂，包括载体聚乳酸-羟基乙酸共聚物，以及包封在所述载体中的抗菌肽。

在本发明所述抗菌肽缓释微球制剂的一个优选实施例中，所述微球制剂的粒径为40-100μm。

在本发明所述抗菌肽缓释微球制剂的一个优选实施例中，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物的分子量为5000-100000，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物中，聚乳酸与聚羟基乙酸的质量百分比为25：75-85：15。优选地，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物中，聚乳酸与聚羟基乙酸的质量百分比为50：50-85：15；更优选地，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物中，聚乳酸与聚羟基乙酸的质量百分比为40：60-60：40。

一种如上所述抗菌肽缓释微球制剂的制备方法，采用复乳溶剂挥发法，用生物可降解高分子材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物为载体材料，包封抗菌肽，通过超声或高速搅拌进行乳化，在低速搅拌下使有机溶剂挥发，形成聚合物缓释微球，具体包括以下步骤：

（1）将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制成中油相；

（2）将抗菌肽溶于pH为5-7的缓冲液中，制成内水相；

（3）将步骤（2）制成的内水相溶液加入到步骤（1）制成的中油相中，其中内水相与中油相的体积比为2-20%，匀化，形成初乳；

（4）将步骤（3）制成的初乳滴加到含有聚乙烯醇的外水相分散介质中，其中初乳与外水相分散介质的体积比为1%-10%，匀化，形成复乳，除去有机溶剂后洗涤干燥，得含有抗菌肽的缓释微球。

所述抗菌肽缓释微球制剂的制备方法可分为以下几个阶段：

（一）初乳的制备（一次乳化）

将内水相与中油相溶液混合，盛装于适当的容器中，冰浴，乳化，形成初乳。可采用间歇式超声（135W，40KHz）法进行乳化，超声的总时间为1-4min。但不限于超声乳化，也可以采用搅拌方式乳化。

（二）复乳的制备（二次乳化）

取适量（体积范围为初乳体积的10-100倍）的4℃预冷的外水相分散溶液，置于机械搅拌器上，在搅拌条件下加入初乳，进行第二次乳化（即复乳化），搅拌速度为1000-4000rpm，搅拌时间为1-5分钟。

（三）溶剂的挥发

调整搅拌速度为400-600rpm，搅拌法挥发有机溶剂，温度为室温，溶剂挥发时间为3-4小时，得到硬化的微球。

（四）微球的洗涤及收集

采用离心法收集微球，用注射用水洗涤三次，用少量水悬浮后冻干，收集微球，于干燥器中保。微球长期不用时，需放置于4℃低温环境下保存。

本发明所述抗菌肽缓释微球制剂的制备方法的一个优选实施例中，所述步骤（1）中的有机溶剂为二氯甲烷或二氯甲烷与乙酸乙酯的混合液，所述二氯甲烷与乙酸乙酯的体积比为60：40-100：0。