[发明专利]一种真核表达重组质粒及其构建方法与稳定表达该质粒的Vero细胞系

权利要求书

1.一种真核表达重组质粒，其特征在于，具有SEQ ID NO：1所示核苷酸序列。

2.如权利要求1所述质粒的制备方法，其特征在于，包括：

步骤1：以pMD18-T-rSLAM质粒为模板，在上游引物、下游引物的存在下扩增获得所述融合基因，所述上游引物序列如SEQ No.2所示，所述下游引物序列如SEQ No.3所示；

步骤2：pIRES2-EGFP载体经酶切，获得Pcmv、IRES、EGFP和SV40pA；

步骤3：取所述融合基因酶切后，与步骤2中所述Pcmv、所述IRES、所述EGFP和所述SV40pA连接，转化受体菌，鉴定阳性克隆，获得所述质粒。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述酶切为Xho I和EcoR I双酶切。

4.一种Vero细胞系，其特征在于，Vero细胞中转染如权利要求1所述的真核表达重组质粒后，经克隆及筛选，获得细胞表面稳定表达有犬瘟热病毒受体貉SLAM的细胞系。

5.如权利要求4所述的Vero细胞系在犬瘟热强毒株的分离及其在犬瘟热病毒研究中的应用。