[发明专利]一种从菥蓂中制备高纯度异牡荆苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种异牡荆苷的制备方法，具体是从菥蓂药材中制备纯度大于98％的异牡荆苷的方法。

背景技术

菥蓂(Thlaspi arvense.L)为十字花科植物菥蓂的干燥地上部分，又叫遏蓝菜、苦芥子、败酱草、瓜子草、菥目，分布在我国大部分地区，但主产于江苏、甘肃、安徽等地，具有清肝明目，和中益气，主治目赤，肿痛，泪出，也常用于治疗肾炎，子宫内膜炎。

异牡荆苷为菥蓂药材中含量最高的黄酮类成分，属于碳苷黄酮，结构稳定，不易降解，并具有抗氧化、抗菌等活性。

检索国内外文献，仅见有一篇关于菥蓂籽挥发油的分析报道(涂杰，张新申，罗霞等.菥蓂籽挥发油的GC/MS分析.化学研究与应用.2006，18(11)：1340-1342)，而对于菥蓂全草的化学成分，包括异牡荆苷的分离研究未见报道。已有的分离纯化异牡荆苷的方法主要是传统的醇提、柱层析纯化，提取方法耗费时间长，硅胶柱层析操作复杂步骤繁多，且最终提取率不高。中国专利“木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法”(公开号CN101172991)中采用的匀浆萃取技术、大孔吸附树脂富集技术及C18反相中压硅胶柱层析方法，从木豆中分离纯化异牡荆苷操作复杂且耗时长、产率低。

综上所述，在利用植物资源制备异牡荆苷的过程中，目前主要制约异牡荆苷提取分离的因素是由于提取工艺落后、耗时长和操作复杂，因此有必要寻找一种简便、安全、高效、经济的提取纯化异牡荆苷的方法。本发明填补了从菥蓂中提取分离异牡荆苷的研究空白，旨在建立一种通过现代分离纯化技术的方法，实现简单、快速高效的制备高纯度异牡荆苷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以菥蓂全草为原料，通过超声提取技术、液-液萃取技术、以及半制备高效液相色谱分离技术，从而快速高效的获得高纯度异牡荆苷的工艺方法。

本发明通过如下方法实现：

(1)将菥蓂药材粉碎，加入体积为药材质量的8～10倍的20％-70％的甲醇或乙醇超声提取1-3h，过滤，将滤液减压浓缩至浸膏，得菥蓂粗提物A。

(2)将A用蒸馏水溶解，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇按体积比1∶1萃取到无色，将乙酸乙酯萃取层减压浓缩至浸膏，得B；正丁醇萃取层减压浓缩得C。

(3)将B和C分别用50％甲醇完全溶解，利用反相半制备高效液相色谱进行分离，收集保留时间相同的目标成分，减压浓缩至干，得到异牡荆苷单体，经面积归一法测定其纯度大于98％。

本发明可快速高效的获得高纯度异牡荆苷，具有操作简便、安全、经济的特点。

附图说明

实验条件：

仪器：北京优联3282型高效液相色谱仪

色谱柱：苏州环球C18分析色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：甲醇-0.4％冰乙酸

流速：1mL·min-1

检测波长：273nm

进样量：20μL

本试验中所用到的异牡荆苷对照品购于Sigma公司

附图1.异牡荆苷对照品HPLC图

附图2.实施例一下制得的异牡荆苷HPLC图

附图3.实施例二下制得的异牡荆苷HPLC图

附图4.实施例三下制得的异牡荆苷HPLC图

附图5.实施例四下制得的异牡荆苷HPLC图

附图6.实施例五下制得的异牡荆苷HPLC图

附图7.实施例六下制得的异牡荆苷HPLC图

附图8.实施例七下制得的异牡荆苷HPLC图

附图9.实施例八下制得的异牡荆苷HPLC图

具体实施方式

实施例一：

(1)将1000克菥蓂药材粉碎，加入体积为药材质量10倍的20％甲醇超声提取3h，过滤，再加入体积为药材质量10倍的20％甲醇超声提取2h，过滤后合并两次提取液，减压浓缩至浸膏，得A。

(2)将A用蒸馏水完全溶解，分别用乙酸乙酯、正丁醇按体积比1∶1萃取至无色，将乙酸乙酯萃取液减压浓缩至浸膏，得B；将正丁醇萃取层减压浓缩得C。

(3)将B和C分别用50％甲醇完全溶解，过0.45μm微孔滤膜，在反相半制备高效液相色谱中利用甲醇-0.4％冰醋酸(15∶85)为流动相，色谱柱为反相C-18柱，检测波长273nm，流速6ml/min，进样量2ml，分批进样进行色谱分离，收集保留时间相同的目标成分，减压浓缩，得异牡荆苷单体，经面积归一法测定其纯度为98.44％。

实施例二：