[发明专利]一种由枯草芽孢杆菌制备的微生物肥料及其制备方法无效

专利信息
申请号: 201110260432.2 申请日: 2011-09-05
公开(公告)号: CN102432362A 公开(公告)日: 2012-05-02
发明(设计)人: 麻林涛;王莉 申请(专利权)人: 麻林涛;王莉
主分类号: C05G1/00 分类号: C05G1/00;C05F11/08;C12N1/20;C12R1/125
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摘要:
搜索关键词: 一种 枯草 芽孢 杆菌 制备 微生物 肥料 及其 方法
【权利要求书】:

1.一种微生物肥料,其特征在于该肥料由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),保藏号为CGMCC No.5091的微生物菌种剂与常规化肥或有机载体混合而成;所述的枯草芽孢杆菌微生物菌种剂由如下方法制备而成:

1)将CGMCC No.5091菌株划线接入斜面培养基(新1培养基),30—38℃培养箱静置黑暗条件下培养36小时;

2)用无菌水冲洗斜面,形成菌悬液;

3)将1体积菌悬液接入20体积的新1液体培养基中,30—38℃有氧培养至菌体浓度为108 个/ml数量级;

4)将步骤3)得到的菌悬液加入到5-10倍体积的新2培养基中,30—38℃有氧培养至菌体浓度为108个/ml数量级;

5)将步骤4)得到的菌悬液加入到50-100倍体积的新3培养基中,35-38℃有氧培养至菌体浓度为 108个/ml数量级;

6)将步骤5)得到的菌悬液加入到5-10倍体积的新4培养基中,35-38℃培养有氧培养至菌体浓度为109个/ml数量级,停止发酵;然后按1:3-5的比例与草炭土混合,造粒,低温烘干获得微生物菌种剂;

其中上述培养基为:新1号培养基(斜面培养基):蛋白胨5g/L,氯化钠5g/L,牛肉膏5g/L,琼脂1.5%-2.0%, PH调至6.5-7.8,

新1号液体培养基:该培养基不含琼脂,其他成分和含量与新1培养基相同, PH调至6.5-7.8,

新2号培养基:淀粉5g/L,蔗糖1g/L,酵母浸出汁0.2g/L,蛋白胨5g/L,牛肉膏5g/L,硫酸铵1g/L,磷酸二氢钾0.5g/L,硫酸镁0.2g/L,氯化钠5g/L, PH调至6.5-7.8,

新3号培养基:淀粉10g/L,蔗糖5g/L,酵母浸出汁0.1g/L,蛋白胨0.5g/L,豆饼粉10g/L,硫酸铵1g/L,磷酸二氢钾0.5g/L,氯化钠5g/L, PH调至6.5-7.8,

新4号培养基:淀粉10g/L,蔗糖2.5g/L,酵母浸出汁0.1g/L,蛋白胨0.5g/L,豆饼粉5g/L,硫酸铵1g/L,磷酸二氢钾0.5g/L,氯化钠5g/L, PH调至6.5-7.8;

所述的常规化肥为氮肥、磷肥和/或钾肥,微生物菌种剂与普通化肥的混合重量比例为1:5-15;所述的有机载体为鸡粪、粉碎玉米芯及煤渣,三者混合比例为1:1-5:1-6,微生物菌种剂与有机载体的混合重量比例为1:5-15。

2.根据权利要求1所述的微生物肥料,其中微生物菌种剂与普通化肥的混合重量比例为1:8-10。

3.根据权利要求1所述的微生物肥料,其中微生物菌种剂与有机载体的混合重量比例为1:9;有机载体鸡粪、粉碎玉米芯和煤渣三者混合比例为1:2:3。

4.一种微生物肥料,其特征在于该肥料由枯草芽孢杆菌(Bacillus laterosporus ),保藏号为CGMCC No.5091的微生物菌种剂与常规化肥或有机载体混合而成;所述的枯草芽孢杆菌微生物菌种剂由如下方法制备而成:

将CGMCC No.5091菌株活化后接入1000ml培养基:淀粉10%,豆饼粉10%,磷酸氢二钾0.2%,硫酸铵0.1%,硫酸镁0.05%,氯化铁0.001%,碳酸钙0.01%,酵母膏0.01%,PH7.2-7.4中,三角瓶摇瓶160RPM,30—38℃培养16小时,然后按1%接种量接种到200L种子发酵罐中(仍为上述同种培养基),通气,30—38℃培养16小时,再按10%接种量接到2000L发酵罐中(仍为上述同种培养基),30—38℃培养20小时后升温至40—45℃在培养10小时,待80%菌体产生芽孢后停止发酵;然后按1:2-10的比例与草炭土混合,造粒,低温烘干获得微生物菌种剂;所述的常规化肥为氮肥、磷肥和/或钾肥,微生物菌种剂与普通化肥的混合重量比例为1:5-15;所述的有机载体为鸡粪、粉碎玉米芯及煤渣,三者混合比例为1:1-5:1-6,微生物菌种剂与有机载体的混合重量比例为1:5-15。

5.根据权利要求4所述的微生物肥料,其中微生物菌种剂与普通化肥的混合重量比例为1:8-10。

6.根据权利要求4所述的微生物肥料,其中微生物菌种剂与有机载体的混合重量比例为1:9;有机载体鸡粪、粉碎玉米芯和煤渣三者混合比例为1:2:3。

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