[发明专利]乳酸双芽菌发酵液的制备方法及利用该发酵液制备乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种乳酸双芽菌发酵液的制备方法及利用该乳酸双芽菌发酵液制备乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的方法。

背景技术

乳酸双芽菌是生物食品防腐剂，其杀菌抑菌能力广泛，效果很好。抑菌机理是建立酶生物合成和活性调节模式，在微生物的细胞膜上形成微孔，导致膜通透性增加、能量系统破坏和食品毒素破坏，保证食物中不产生过敏原，因而能迅速的杀灭食品中的微生物，并对食品中的少量微生物进行抑制，避免其繁殖和水溶性糖蛋白免疫反应，从而达到防腐保鲜的目的。

目前，乳酸双芽菌的制备工艺复杂，生产中需要经过大量排污反应处理等工艺技术，且常使用化学合成原料，易产生异味。其防腐剂的制备存在生产成本高(高达25000元/吨)，产量低，即以投资额定量为生产核算，投资1000万元，仅可建5000吨/年的生产线。

发明内容

本发明是要解决现有乳酸双芽菌的制备工艺复杂，其防腐剂的制备存在生产成本高和产量低的问题，提供乳酸双芽菌发酵液的制备方法及利用该发酵液制备乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的方法。

本发明乳酸双芽菌发酵液的制备方法，按以下步骤进行：一、分别对乳酸乳球菌、嗜热脂环酸芽孢杆菌、球芽孢杆菌和二芽孢接合酵母进行活化，得四种菌的活化菌液；二、从四种菌的活化菌液中提取四种菌的菌体；三、将步骤二得到的四种菌的菌体按菌体数量比1∶1∶1∶1进行混合，然后接种于装有发酵培养基的发酵罐中，接种量为8％～12％，在发酵温度为29～31℃、摇床速度为100～150r/min的条件下发酵45～50h，得发酵液；四、将发酵液置于摇床上于100～150r/min培养45～50h，即可完成乳酸双芽菌发酵液的制备。

利用上述乳酸双芽菌发酵液制备乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的方法，按以下步骤进行：一、按体积份数将1～3份的乳酸链球菌素、1～5份的纳他霉素、1～5份的丙酸、2～8份的竹叶抗氧化物、2～5份的壳聚糖、2～4份的乙二胺四乙酸二钠、0.2～0.8份的体积百分比浓度为75％的乙醇、0.2～0.6份的生育酚和75～85份的活化水混合，得到混合液；二、按体积百分比将75～80份的混合液和20～25份的乳酸双芽菌发酵液混合，在45～55℃下反应1～3h，即可完成乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的制备。

本发明乳酸双芽菌发酵液的制备工艺简单，不需要经过大量排污反应处理，在生产过程中无化学合成原料，在发酵过程中有少量培养基残留物，残留物为发酵液的0.75％(即100kg发酵液，有0.75kg残留物)，在生产过程中不产生三废，不排污，无异味，各种生产罐内均为封闭式低温发酵和配制，卫生环境整洁，室内空气无污染源，清洗罐用水回收，排放为零。

本发明方法制备乳酸双芽菌发酵液复合防腐剂的成本低，为15000元/吨；产量高，投资1000万元，可建6000吨/年的生产线。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式乳酸双芽菌发酵液的制备方法，按以下步骤进行：一、分别对乳酸乳球菌、嗜热脂环酸芽孢杆菌、球芽孢杆菌和二芽孢接合酵母进行活化，得四种菌的活化菌液；二、从四种菌的活化菌液中提取四种菌的菌体；三、将步骤二得到的四种菌的菌体按菌体数量比1∶1∶1∶1进行混合，然后接种于装有发酵培养基的发酵罐中，接种量为8％～12％(体积)，在发酵温度为29～31℃、摇床速度为100～150r/min的条件下发酵45～50h，得发酵液；四、将发酵液置于摇床上于100～150r/min培养45～50h，即可完成乳酸双芽菌发酵液的制备。

本实施方式乳酸双芽菌发酵液的制备工艺简单，不需要经过大量排污反应处理，在生产过程中无化学合成原料，在发酵过程中有少量培养基残留物，残留物为发酵液的0.75％(即100kg发酵液，有0.75kg残留物)，在生产过程中不产生三废，不排污，无异味，各种生产罐内均为封闭式低温发酵和配制，卫生环境整洁，室内空气无污染源，清洗罐用水回收，排放为零。

本实施方式制备的乳酸双芽菌发酵液为橙黄色液体，略带竹叶粽子香气。

本实施方式步骤一所述乳酸乳球菌购买自中国科学院微生物研究所普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为ACCC 10535r，保藏日期为2001年6月1日。

本实施方式步骤一所述嗜热脂环酸芽孢杆菌购买自中国科学院微生物研究所普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为ACCC 1022lr，保藏日期为2006年6月8日。