[发明专利]一种细胞色素C的纯化工艺

权利要求书

1.一种细胞色素C的纯化工艺，包括以下步骤：

（1）从动物脏器或者酵母中提取得到细胞色素C的粗提液；

（2）向粗提液中加入无机盐进行盐析，静置离心弃去沉淀的杂蛋白，收集上清液；

（3）加缓冲液调节上清液中无机盐浓度至20% ~ 35%，再用前沿疏水色谱法对其进行纯化，即将所得溶液连续上样于预先用20% ~ 35%的无机盐溶液平衡过的疏水色谱柱中，收集穿透液；

（4）用20% ~ 35%无机盐溶液冲洗色谱柱至吸光度达到稳定，收集色谱流出液，与穿透液合并，即为纯化后的细胞色素C。

2.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：步骤（1）中，用pH值3 ~ 5的稀硫酸溶液进行提取，然后用稀氨水调节pH至6 ~ 8。

3.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：所述动物脏器是猪、牛、羊、马或狗的心脏、肝脏、肾脏。

4.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：所述的无机盐是碱金属、碱土金属或NH₄⁺的磷酸盐、硫酸盐、盐酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐。

5.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：步骤（2）中，加入无机盐后的无机盐终浓度为35% ~ 70%。

6.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：步骤（3）中，缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、HEPES缓冲液、TES缓冲液、BES缓冲液或MOPS缓冲液。

7.根据权利要求1所述的细胞色素C的纯化工艺，其特征在于：疏水色谱柱中填料是以硅胶、有机高分子聚合物或多糖聚合物为基质，以苯基、醚基、C1 ~ C4烷基、邻二醇基为配基。