[发明专利]一种新的环维黄杨星D纯化方法

权利要求书

1.一种新的环维黄杨星D纯化方法，其特征在于：环维黄杨星D的纯化过程采用了以介孔硅胶为载体，并以环维黄杨星D为模板分子的表面印迹固定相。

2.按权利要求1所述的介孔硅胶，其结构特征在于：介孔硅胶的孔径在10-20nm之间。

3.按权利要求1所述的介孔硅胶，其结构特征在于：介孔硅胶是球形颗粒。

4.按权利要求1所属的介孔硅胶的制备方法，其特征在于：采取了如下步骤：

——室温下，称取适量三嵌段聚合物P123和氯化铵，加入去离子水、乙醇和浓盐酸的混合溶液中，室温搅拌使完全溶解得到澄清透明溶液；

——将适量1，3，5-三甲苯滴加到上述反应液中，在35℃搅拌10小时；

——在剧烈搅拌下，滴加适量四乙氧基硅烷到上述反应液中，35℃继续搅拌15分钟。

——将上述反应液转移至不锈钢聚四氟反应釜中，35℃静置水热反应24小时后再90℃反应24小时；

——趁热过滤，分别用乙醇、去离子水充分洗涤，90℃常压干燥10小时；

——550℃高温煅烧6小时除去模板剂。

5.按权利要求1所属的介孔硅胶表面印迹固定相的制备方法，其特征在于：采取了如下步骤：

——介孔硅胶的活化。将介孔硅胶置于浓盐酸和去离子水混合溶液中，125℃回流12小时，用去离子水洗至中性，100℃真空干燥24小时。

——介孔硅胶的衍生化。称取适量上述活化后的介孔硅胶，加入乙醇，去离子水，搅拌。滴加γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，氮气保护下50℃反应24小时。冷却后过滤，分别用乙醇、去离子水洗涤，室温真空干燥24小时。

——介孔硅胶表面印迹固定相的合成。取一定量干燥后的环维黄杨星D对照品、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯溶解于氯仿中，氮气保护下搅拌30分钟，加入适量引发剂偶氮二异丁腈超声使溶解，通氮气5分钟备用。称取适量上述衍生化的介孔硅胶，加入上述混合溶液，氮气保护下搅拌15分钟后50℃引发聚合8小时。反应结束后，过滤，将所得的介孔硅胶表面印迹固定相在索氏提取器中用甲醇∶乙酸＝4∶1的混合溶剂反复提取48小时以除去环维黄杨星D模板分子，最后用甲醇洗涤，50℃真空干燥24小时即得。

6.按权利要求1所述的新的环维黄杨星D纯化方法。其特征在于：采用匀浆装柱法将权利要求5中的介孔硅胶表面印迹固定相填充于不锈钢色谱柱(50mm×4.6mm)。将色谱柱装于高效液相色谱仪，运用蒸发光散射检测器，采用梯度洗脱。流动相甲醇中醋酸体积百分数在10分钟内由0％变为0.5％。将环维黄杨星D原料药溶于甲醇后泵入色谱柱，梯度洗脱进行分离纯化，分段收集再浓缩、结晶、烘干即得高纯度的环维黄杨星D。

7.权利要求1至5中任一项的介孔硅胶表面印迹固定相用于纯化环维黄杨星D。