[发明专利]从动物加工副产物中提取RNA活性物的方法无效
申请号: | 201110268448.8 | 申请日: | 2011-09-09 |
公开(公告)号: | CN102321614A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
发明(设计)人: | 周正兵;俞保彬;刘显东;周天琼 | 申请(专利权)人: | 杭州华津药业股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/02;C07H1/06 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 朱建新;逯长明 |
地址: | 310013 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 动物 加工 副产物 提取 rna 活性 方法 | ||
1.一种从动物加工副产物中提取RNA活性物的方法,包括以下步骤:
①、配制下述试剂:
试剂A:0.1mol/l的醋酸盐缓冲液中包含0.4~0.6wt%的十二烷基硫酸钠、0.1%~0.3wt%的聚乙烯硫酸酯、0.1%~0.3wt%乙二胺四乙酸二钠,用醋酸调节其pH值至5.0;
试剂B:将0.1wt%的8-羟基喹啉苯酚与试剂A等体积混合,振摇200~400次,避光静置8~14小时,取上层液体;
试剂C:缓冲液饱和酚:将0.1wt%的8-羟基喹啉苯酚与试剂A等体积混合,振摇200~400次,避光静置8~14小时,取下层液体;
②、取新鲜的动物加工副产物,于0~8℃下破碎;
③、向步骤②破碎物中加入4~6倍重量的试剂B和4~6倍重量的试剂C,匀浆处理,离心取上清液加入0.05~0.30g/L蛋白酶,于30~50℃水浴30~50min;冷却至0~10℃;
④、取步骤③冷却液的上层,加乙醇醇沉,得产品。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤②破碎至原料尺寸为5~10μm。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤③中蛋白酶为木瓜蛋白酶或中性蛋白酶。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:该方法包括纯化过程:向步骤④产品中加入0.3mol/L的醋酸盐缓冲液,搅拌,离心分离,取上清液;向上清液中加入2~3倍重的-10~-20℃的无水乙醇,保温1~2小时,离心分离,得沉淀物。
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