[发明专利]检测氯霉素的酶联免疫试剂盒及其应用有效
申请号: | 201110279098.5 | 申请日: | 2011-09-20 |
公开(公告)号: | CN103018451A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 何方洋;吴鹏;段盈盈;浦小容;李勇;崔廷婷;陈炜玲;齐向武 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N1/28 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 氯霉素 免疫 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测氯霉素的酶联免疫试剂盒,其特征在于它含有:
(1)包被有包被原的酶标板;
(2)酶标记物;
(3)氯霉素标准品溶液;
(4)底物显色液;
(5)终止液;
(6)浓缩洗涤液;
(7)浓缩复溶液,
所述包被原为氯霉素抗原、抗体或抗抗体,所述酶标记物为酶标记氯霉素抗原、酶标记氯霉素抗体或酶标记抗抗体,
当酶标板上包被抗原且酶标记物为酶标记抗抗体或酶标板上包被抗抗体且酶标记物为酶标记抗原时还含有氯霉素特异性抗体工作液。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述氯霉素抗原是由氯霉素半抗原与载体蛋白偶联得到,所述氯霉素抗体是由所述偶联抗原制备获得,其中所述氯霉素半抗原是将氯霉素分子结构中的硝基通过催化加氢反应得到的。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于所述载体蛋白为鼠血清蛋白、甲状腺蛋白、牛血清蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或纤维蛋白原。
4.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于所述氯霉素抗体为单克隆抗体。
5.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于所用包被缓冲液为pH值为9.6,0.05mol/L的碳酸盐缓冲液;所用封闭液为pH值为9.1~9.5,含有3%~10%小牛血清、0.2%吐温-20、0.1~0.3mol/L的碳酸盐缓冲液,所述百分比为重量体积百分比。
6.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于所述酶标记物的标记酶为辣根过氧化物酶或细菌提取碱性磷酸酯酶,当标记酶为辣根过氧化物酶时,底物显色液A液为过氧化氢或过氧化脲,底物显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺,终止液为1~2mol/L的硫酸或盐酸缓冲液;当标记酶为细菌提取碱性磷酸酯酶时,底物显色液为对硝基磷酸盐缓冲液,终止液为1~2mol/L氢氧化钠。
7.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于所用浓缩洗涤液为pH值为7.1~7.5,含有0.8%~1.2%吐温-20、0.01‰~0.03‰硫柳汞防腐剂、0.01~0.03mol/L的磷酸盐缓冲液;所用浓缩复溶液为pH值为7.2~7.7,含有8%~12%卵清蛋白、0.1~0.4mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为重量体积百分比。
8.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于氯霉素标准品溶液的浓度分别为0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.3μg/L、1.2μg/L、4.8μg/L。
9.一种检测样品中氯霉素残留的方法,包括步骤:
(1)样品前处理;
(2)用权利要求1~8任一项所述的试剂盒进行检测;
(3)分析检测结果。
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