[发明专利]一种检测沙丁胺醇药物的胶体金试纸卡及检测方法

权利要求书

1.一种检测沙丁胺醇药物的胶体金试纸卡，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和PVC底板，其特征在于所述反应膜上有包被有沙丁胺醇-载体蛋白偶联物构成的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体构成的质控线，所述结合物释放垫包被有沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物。

2.如权利要求1所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述的沙丁胺醇-载体蛋白偶联物由沙丁胺醇半抗原与载体蛋白偶联得到；所述的沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物中的沙丁胺醇单克隆抗体由沙丁胺醇-载体蛋白偶联物作为免疫原免疫动物获得；所述的载体蛋白为牛血清白蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲状腺蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或人血清白蛋白；所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到的。

3.如权利要求1或2所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述的沙丁胺醇半抗原的制备方法主要包括如下步骤：

(1)取1-3g沙丁胺醇，溶入20-50ml DMF中，然后加入10％摩尔当量的TEMPO和10％摩尔当量的四丁基氯化铵，20-50ml 0.5M的NaHCO₃水溶液，室温下搅拌30分钟后，加入1.1-1.5摩尔当量的NCS，室温反应2-5小时后，出去大部分溶剂，乙酸乙酯萃取，洗涤，干燥，除去溶剂后柱层析纯化，得到白色固体，为沙丁胺醇单氧化物。

(2)1-2g步骤(1)所得沙丁胺醇氧化物，溶入20-30ml DMF中，加入2-5摩尔当量的乙二胺，室温至100℃反应5-20小时，除去溶剂，乙醇-水中重结晶，得到白色固体，为沙丁胺醇单氧化物的乙二胺缩合产物，即为沙丁胺醇半抗原。

4.如权利要求1或2所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物中的沙丁胺醇单克隆抗体。

5.如权利要求1～4所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述的结合物释放垫的部分区域被覆盖于样品吸收垫之下。

6.一种权利要求1～5所述的胶体金试纸卡的制备方法，主要包括如下步骤：

(1)制备包被有沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

(2)制备具有包被有沙丁胺醇-载体蛋白偶联物构成的检测线和包被有羊抗鼠IgG构成的质控线的反应膜；

(3)将(1)和(2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样本吸收垫、吸水垫和背衬组装成试纸卡。

7.一种应用权利要求1～6任一项所述的沙丁胺醇胶体金试纸卡检测沙丁胺醇药物的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)样品的前处理；

(2)用胶体金试纸卡进行检测；

(3)分析检测结果。