[发明专利]一种喹诺酮类药物的化学发光酶联免疫检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测喹诺酮类药物的化学发光免疫检测试剂盒，用于检测动物组织(猪肉、鸡肉、猪肝、鸡肝)、水产品(鱼、虾等)、蜂蜜中的喹诺酮类药物含量或残留量。属于免疫学检测领域。

背景技术

喹诺酮类抗菌药(4-quinolones)，又称吡酮酸类或吡啶酮酸类，是一类较新的合成抗菌药，该类药物的开发可以追溯到1962年，Lesher从合成抗疟药氯喹中分离出一种副产品-萘啶酸，喹诺酮类历经40多年的发展，共开发出了四代喹诺酮类药物，共计50多种药物。

喹诺酮类抗菌药以细菌的脱氧核糖核酸(DNA)为靶位，通过选择性的抑制细菌DNA促旋酶与拓扑异构酶IV而造成染色体的不可逆损害，而使细菌细胞不再分裂，主要作用于革兰阴性菌的抗菌药物，对革兰阳性菌的作用较弱(某些品种对金黄色葡萄球菌有较好的抗菌作用)。

喹诺酮抗菌药按发明先后及其抗菌性能的不同，分为一、二、三、四代，第一代喹诺酮类抗菌药的品种有萘啶酸(Nalidixic acid)和吡咯酸(Piromidic acid)等，第二代喹诺酮类抗菌药的品种有新恶酸(Cinoxacin)和甲氧恶喹酸(Miloxacin)等，第三代喹诺酮类抗菌药的品种有诺氟沙星(Norfloxaicin)、氧氟沙星(Ofloxacin)、培氟沙星(Perfloxacin)、依诺沙星(Enoxacin)和环丙沙星(Ciprofloxacin)等，第四代喹诺酮类抗菌药的品种有加替沙星(Gatifloxacin)与莫昔沙星(Moxifloxacin)等。

喹诺酮类药物可用于治疗呼吸道感染、泌尿生殖系统感染、消化系统感染及其他类的各种感染，还可用于抗肿瘤和抗病毒作用，但该类药物对人体也存在很大的不良反应，如胃肠道反应、中枢反应、可诱发癫痈、影响软骨发育、易产生结晶尿及易导致肝损伤等。

喹诺酮类药物残留分析通常包括：选用适当的溶剂提取，进一步利用液液萃取法、固相萃取法等进行净化、浓缩，最后用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography，HPLC)、高效毛细管电泳法(Capillary electrophorctic，CE)、液相色谱质谱联用技术(Liquid chromatography-mas spectrometry，LC-MS)等方法进行检测，有时还使用气相色谱法(Gas chromatography，GC)，高效薄层色谱法(High pefformancthinlay erchromatogram，HPTLC)，微生物法(Microbiological assay，MA)、免疫分析法(Immunoassay，IA)等测定。

目前的检测方法主要是仪器分析的方法，而酶联免疫分析方法，只能检测一种或者几种药物，对于种类较多的喹诺酮类药物还远远不能达到同时检测多残留的要求。酶联免疫试剂盒因为操作简单，省时，是各个国家检测兽药残留的首选方法。化学发光免疫检测方法具有特异性强、稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高、试剂稳定且有效期长(6～18个月)等优点，其检测限比酶联免疫法和理化检测方法高几个数量级。化学发光底物液是化学发光酶免疫检测方法的关键试剂，配制出低成本且性能良好，适合国产仪器使用的的发光底物液，可降低化学发光方法的使用成本，有利于在基层的普及。建立稳定的化学发光酶免疫分析方法，也是进行商品化学发光试剂盒的研制的基础。建立喹诺酮类药物多残留化学发光酶联免疫检测试剂盒检测方法对于于严把食品安全的检验环节有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种喹诺酮类药物的化学发光酶联免疫检测试剂盒。该试剂盒具有检测灵敏度高、应用灵活、方便的特点。

一种喹诺酮类药物的化学发光酶联免疫检测试剂盒，包括盒体，设在盒体内的酶标板和设在盒体内的试剂；其特征在于，所述酶标板的各孔包被有以喹诺酮类药物与卵清蛋白偶联制成的包被抗原；所述试剂包括：喹诺酮类药物的单克隆抗体、辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、喹诺酮类药物系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液、化学发光液。

所述酶标板优选乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光酶标板。

所述酶标板的各孔包被有以喹诺酮类药物与卵清蛋白偶联制成的包被抗原；其中所述包被抗原浓度优选20.0μg/mL。