[发明专利]一种沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201110279330.5 | 申请日： | 2011-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN102329866A | 公开（公告）日： | 2012-01-25 |
| 发明（设计）人： | 何东华;蔡晓沂 | 申请（专利权）人： | 泰普生物科学（中国）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 福州市鼓楼区博深专利代理事务所(普通合伙) 35214 | 代理人： | 林志峥 |
| 地址： | 350002 福建省福州市金*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 沙眼 衣原体 pcr 荧光 定量 快速 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，包括PCR反应液，其特征在于，所述PCR反应液含有引物和荧光探针；所述引物分为上游引物和下游引物：
上游引物：5’-CTGTACATTAGGAGCCACCA-3’；
下游引物：5’-CAACAGATTGATCAAAGCTC-3’；
荧光探针：5’-FAM-GATATCTTAAAGGAAATTCAGCATCTTTCAA-TAMRA-3’。
2.按权利要求1所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA聚合酶、阳性质控品、弱阳性质控品、阴性质控品、阳性定量参比品、DNA提取液。
3.按权利要求1所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，引入了一个人工构建的内参照系统用于避免检测结果假阴性，内参照系统包括内参探针、引物和内参DNA。
4.按权利要求3所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，所述内参照系统为拟南芥内参照系统，所述内参照系统包括上游引物序列：SEQ ID NO.4、下游引物序列：SEQ ID NO.5和探针序列：SEQ ID NO.6。
5.按权利要求1所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品浓度为10倍梯度106copies/mL-107copies/mL，所述弱阳性质控品浓度为10倍梯度103copies/mL-104copies/mL。
6.按权利要求1所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶包括tap酶、UNG酶。
7.一种沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测方法，其特征在于，其中PCR扩增所用引物为：上游引物序列如SEQ ID NO.1，下游引物序列如SEQ ID NO.2，荧光探针序列如SEQ ID NO.3。
8.按权利要求7所述的沙眼衣原体的PCR荧光定量快速检测方法，其特征在于，所述荧光探针5’端标记FAM荧光基团，3’端标记TAMRA淬灭基团。
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