[发明专利]一条编码ADI的优化DNA分子及表达ADI的工程菌有效
| 申请号： | 201110282842.7 | 申请日： | 2011-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN102321643A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 侯建华;杨璐 | 申请（专利权）人： | 北京凯因科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12N9/80;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176 北京市大*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一条 编码 adi 优化 dna 分子 表达 工程 | ||
【权利要求书】：
1.一条编码精氨酸脱亚胺酶的优化DNA分子，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。
2.一种表达载体pET-30a-ADI，其特征是所述表达载体含有权利要求1所述的优化的DNA分子序列。
3.含有权利要求2所述表达载体的大肠埃希氏工程菌pET-30a-adi/BL21(DE3)，其保藏编号为CGMCC No.5159。
4.权利要求1所述优化DNA分子在生产精氨酸脱亚胺酶中的应用。
5.权利要求2所述的表达载体在生产精氨酸脱亚胺酶中的应用。
6.权利要求3所述的工程菌在生产精氨酸脱亚胺酶中的应用。
7.一种精氨酸脱亚胺酶的制备方法，包括：选取工程菌菌株pET-30a-adi/BL21(DE3)，转至LB培养基中，发酵培养，将所得发酵液经破菌、包涵体洗涤以及抽提、复性和精制步骤，得到目的蛋白精氨酸脱亚胺酶。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述发酵培养步骤中，在培养物中加入诱导剂IPTG后进行诱导表达，所述破菌为超声破菌。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述精制步骤是采用柱层析精制。
10.权利要求9所述的方法，其中所用柱层析为离子交换柱或分子筛中的任意一种或组合。
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