[发明专利]融合有V5标签重组蛋白的ELISA定量检测试剂盒和方法

权利要求书

1.一种融有V5标签蛋白的ELISA定量检测试剂盒，其特征是，包括有：

(A)包被有V5多肽的微孔板，每个微孔包被100μL的V5多肽，V5多肽的浓度为0.015μg/mL-2μg/mL；

(B)1mg/mL的抗-V5多肽单克隆抗体的工作浓度的稀释比例为：1∶500-64000，用量为每微孔100μL。

2.根据权利要求1所述的融有V5标签的蛋白的ELISA定量检测试剂盒，其特征是，所述V5多肽的包被浓度为0.125μg/mL-0.5μg/mL，所述抗-V5多肽单克隆抗体的工作浓度为0.25-1μg/mL。

3.根据权利要求2所述的融有V5标签的蛋白的ELISA定量检测试剂盒，其特征是，所述V5多肽的包被浓度为0.25μg/mL。

4.根据权利要求1-3任一项所述的融有V5标签的蛋白的ELISA定量检测试剂盒，其特征是，所述抗-V5多肽单克隆抗体的工作浓度为0.5μg/mL。

5.一种融有V5标签的蛋白的检测方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)用待测样品对抗-V5多肽单克隆抗体进行稀释，得混合液，1mg/mL的抗-V5多肽单克隆抗体稀释比例为：1∶500-64000；混合液4℃预孵育过夜；

(2)在包被有V5多肽的微孔板中每孔加入100μL上述混合液，37℃孵育0.8-1.2小时；所述微孔板每孔包被V5多肽100μL，V5多肽的浓度为：0.015μg/mL-2μg/mL；

(3)清洗，每孔加入羊抗鼠IgG-HRP抗体，37℃孵育；清洗后加入TMB底物溶液显色；

(4)于各反应孔中加入终止液反应，在酶标仪450nm波长下检测OD值。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征是，所述V5多肽的包被浓度为0.25μg/mL。

7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征是，所述抗-V5多肽单克隆抗体的工作浓度为0.5μg/mL。