[发明专利]一种高纯度肝素苄酯盐及其制法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及由一种高纯度肝素苄酯盐，及其制备方法与在制备低分子肝素中的应用。

背景技术

肝素是动物(猪或牛)来源的硫酸多糖混合物，由于它们具有良好的抗血栓形成性质，因而得到了广泛应用，例如制备抗血栓形成药物、治疗心血管疾病的药物、和治疗脑血管疾病的药物等。

然而，天然肝素有许多缺陷，这些缺陷限制肝素的应用。一个主要缺陷是肝素用药过多可致自发性出血，故每次注射前应测定凝血时间。此外，长期使用，肝素还可引起过敏反应、血小板减少、骨质疏松和自发性骨折。

肝素钠自发性出血危险很大，临床使用中必须监测凝血时间，这给医生和患者均带来很大不便。同时，血小板减少和骨质疏松等不良反应也让医生在使用中有所顾忌。低分子肝素使用过程中无须监测凝血时间，并且大大降低了肝素长期使用产生的上述不良反应。

目前，制备低分子肝素的主要方法有亚硝酸盐降解法、过氧化氢降解法、肝素酶降解法以及肝素苄酯的碱降解法等。其中，肝素苄酯的碱降解法是将肝素与季铵盐成盐，然后将肝素季铵盐与氯化苄在二氯甲烷中发生酯化反应生成肝素苄酯季铵盐，往此溶液中加入醋酸钠甲醇溶液，过滤获得肝素苄酯钠盐，根据酯化率的高低，选择相应的降解条件，将此钠盐在碱性溶液中进行降解，获得低分子肝素。由此可见，如何准确测定酯化率在整个制备方法中非常关键。另外，由于低分子肝素是混合物，过程控制杂质变得非常重要。因此，高纯度的肝素苄酯碱金属或碱土金属盐是获得高质量低分子肝素的前提。

然而，上述制备方法具有如下缺点：(1)肝素苄酯钠盐纯度低：当醋酸钠甲醇溶液与肝素苄酯季铵盐反应生成肝素苄酯钠盐时，由于肝素为大分子长链，肝素苄酯钠盐在甲醇中溶解度很低，随着醋酸钠甲醇溶液的加入，来不及反应的含有季铵盐的肝素苄酯钠盐同时被沉淀出，这样导致反应不完全。实验证明，即使进行长时间的搅拌或多次与醋酸钠甲醇溶液重复反应，但毕竟是混悬状态，仍有相当部分的季铵盐不能全部反应，从而残留在肝素苄酯钠盐链上。(2)肝素苄酯钠盐的酯化率难以精确测定：由于反应为非溶液状态，反应物和产物均为沉淀，每次反应的程度均不易重现，季铵盐、氯化苄和醋酸钠残留每次都会有差异，这给酯化率的测定带来了不确定性，从而影响后续的降解条件的选择，进而影响产品的质量，甚至会影响生产的成功率。(3)最终产品的安全性隐患：反应过程中生成的季铵盐和过量的氯化苄、醋酸钠均不易被甲醇洗掉，会残留在肝素苄酯钠盐中。在后续降解中也会产生新的杂质，给产品的安全性带来隐患。

也有文献中提到，生成肝素苄酯季铵盐后，先将反应溶媒四氢呋喃直接蒸馏除去，然后加入甲醇混悬沉淀，过滤获得肝素苄酯季铵盐，然后将其加入醋酸钠的水溶液，生成肝素苄酯钠盐。这种制备方法需要先蒸馏除去反应溶媒，而实验证明，肝素苄酯季铵盐易溶于甲醇，因此蒸去反应溶媒后加入甲醇并不能得到沉淀，同时大大增加了产业化的难度和成本。

因此，本领域迫切需要开发高纯度的肝素苄酯盐，以及简单可行、适合产业化的制备方法及其在低分子肝素制备中的应用。

发明内容

本发明的目的就是提供一种高纯度的肝素苄酯盐，以及其简单可行、适合产业化的制备方法及其在低分子肝素制备中的应用。

在本发明的第一方面，提供了一种高纯度肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐的制备方法，包括步骤：

(a)将含有季铵盐的肝素苄酯盐，与碱金属或碱土金属盐的水性溶液进行混合，从而反应生成肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐；和

(b)在步骤(a)所形成反应混合物中，加入对于肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐而言的不溶性溶剂，从而沉淀并分离出所述肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐。

在另一优选例中，所述的含有季铵盐的肝素苄酯盐是肝素季铵盐与苄基卤化物在有机溶剂中发生酯化反应生成的反应产物。

肝素来源于牛、猪的肝素，即猪肝素或牛肝素及其衍生物。

在另一优选例中，所述苄基卤化物为卤化苄，较佳为氯化苄或溴化苄，更佳为氯化苄。

在另一优选例中，所述有机溶剂为二氯甲烷。

在另一优选例中，所述碱金属盐为氯化钠、醋酸钠、氯化钾、或硫酸钠；所述碱土金属盐为氯化钙、或氯化镁。

较佳为醋酸钠，更佳地为氯化钠。

在另一优选例中，所述碱金属盐或碱土金属盐的水性溶液浓度为0.1w/v％～95w/v％。

在另一优选例中，所述碱金属盐或碱土金属盐的水性溶液浓度为3w/v％～50w/v％。

在另一优选例中，所述碱金属盐或碱土金属盐的水性溶液浓度为5w/v％～25w/v％。