[发明专利]一种环脂肽化合物或其盐的纯化方法有效
申请号: | 201110290436.5 | 申请日: | 2011-09-27 |
公开(公告)号: | CN102443050A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 张兆利;刘石东;卓忠浩;季晓铭 | 申请(专利权)人: | 上海天伟生物制药有限公司 |
主分类号: | C07K7/56 | 分类号: | C07K7/56;C07K1/22 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 张睿 |
地址: | 201108 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 环脂肽 化合物 纯化 方法 | ||
1.一种如式I化合物或其盐的纯化方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(1)将含有式I化合物或其盐的发酵液和有机溶剂混合,进行抽提,过滤或离心后得到抽提液1;
(2)将抽提液1进行稀释或真空浓缩,降低有机溶剂含量,得到抽提液2;
(3)将抽提液2上样至大孔吸附树脂;
(4)将水、有机溶剂、或有机溶剂和水的混合溶液作为洗涤液洗涤大孔吸附树脂;和
(5)将水、有机溶剂、或有机溶剂和水的混合溶液作为洗脱液,将式I化合物从大孔吸附树脂上洗脱下来;
2.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)是将抽提液2流过装载有大孔吸附树脂的层析柱,或将吸附树脂直接投入含有式I化合物的抽提液中,搅拌5-120分钟,使含有式I化合物的抽提液2上样至大孔吸附树脂。
3.如权利要求2所述的纯化方法,其特征在于,所述的流过速度为每小时0.1-10个柱床体积。
4.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(1)中所述的发酵液包括将发酵液过滤或离心后得到的菌体。
5.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(2)中,以抽提液2的总体积计,其中有机溶剂的体积百分比为0-40%。
6.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(3)中,式I化合物粗品和大孔吸附树脂的重量体积比为0.1-1.0∶100(g/ml)。
7.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(4)中,以洗涤液的总体积计,其中有机溶剂的体积百分比为0-40%,优选20%-40%。
8.如权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤(5)中,以洗脱液的总体积计,其中有机溶剂的体积百分比为40-90%,优选40-60%。
9.如权利要求1-8任一所述的纯化方法,其特征在于,所述的大孔吸附树脂选自:由苯乙烯与二乙烯苯聚合而成的非极性的芳香族吸附树脂;或具有甲基丙烯酸酯单元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸附树脂。
10.如权利要求9所述的纯化方法,其特征在于,所述的吸附树脂选自:XAD-1、XAD-2、XAD-3、XAD-4、XAD-5、XAD-16、XAD-16HP、HP-10、HP-20、HP-20ss、HP-21、HP-30、HP-40、HP-50、SP-825、SP-850、SP-70、SP-700、SP-207、SP207ss、XAD-6、XAD-7、XAD-7HP、XAD-8、HP-2MG、或它们的混合物。
11.如权利要求1-8任一所述的纯化方法,其特征在于,所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、丁酮、或它们的混合物。
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