[发明专利]一种环脂肽化合物或其盐的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及有机化学领域，尤其涉及一种如式I所示的多肽化合物或其盐的纯化方法。

背景技术

真菌感染已经成为免疫缺陷病人发病率和死亡率居高不下的主要原因。在过去的20年里，霉菌感染的发病率显著增加。真菌感染的高危人群包括重症病人，外科病人以及那些患有HIV感染，血癌和其它肿瘤疾病的病人。那些经过器官移植的病人同样是真菌感染的高危人群。

棘球白素作为一类新的抗真菌药物，在治疗由念珠菌或曲霉引起的感染方面效果良好。这类药物又以卡泊芬净和米卡芬净为代表。棘球白素类药物通过抑制1，3-β糖苷键的形成来抑制真菌，从而更好地减小了对人体的伤害，在高效的同时尽可能的降低了副作用，因此它们在使用过程中比传统抗真菌药更安全。

FK463(米卡芬净)是如式III所示的化合物，它是以式I化合物FR901379(M₀)为前体通过酶解掉侧链得到式II化合物FR179642(M₁)，然后经过化学修饰得到的。可见，要得到高纯度的米卡芬净，高纯度高的式I化合物是关键。

EP0431350B1公开了一种纯化式I化合物的方法：将发酵液直接用丙酮抽提，过滤浓缩除去丙酮后用乙酸乙酯洗涤，然后用正丁醇萃取的方法得到，然后将异丁醇相浓干后，上硅胶柱后得到式I化合物。该方法需要大量溶剂，同时该方法使用了硅胶这种不降解，对环境污染严重的物质，不利于环保，且严重危害操作人员的健康，不适合工业化大规模生产。

因此，本领域急需找到一种不需要大量溶媒，不使用硅胶的纯化方法，克服上述现有技术中存在的缺陷，同时提高式I化合物的纯度。

发明内容

本发明旨在提供一种纯化式I化合物的方法。

本发明提供了一种如式I化合物或其盐的纯化方法，所述的方法包括步骤：

(1)将含有式I化合物或其盐的发酵液和有机溶剂混合，进行抽提，过滤或离心后得到抽提液1；

(2)将抽提液1进行稀释或真空浓缩，降低有机溶剂含量，得到抽提液2；

(3)将抽提液2上样至大孔吸附树脂；

(4)将水、有机溶剂、或有机溶剂和水的混合溶液作为洗涤液洗涤大孔吸附树脂；和

(5)将水、有机溶剂、或有机溶剂和水的混合溶液作为洗脱液，将式I化合物从大孔吸附树脂上洗脱下来；

在本发明提供的纯化方法中，所述步骤(3)是将抽提液2流过装载有大孔吸附树脂的层析柱，或将吸附树脂直接投入含有式I化合物的抽提液中，搅拌5-120分钟，使含有式I化合物的抽提液2上样至大孔吸附树脂；所述的流过速度为每小时0.1-10个柱床体积。

在本发明提供的纯化方法中，步骤(1)中所述的发酵液包括将发酵液过滤或离心后得到的菌体。

在本发明提供的纯化方法中，步骤(2)中，以抽提液2的总体积计，其中有机溶剂的体积百分比为0-40％。

在本发明提供的纯化方法中，步骤(3)中，式I化合物粗品和大孔吸附树脂的重量体积比为0.1-1.0∶100(g/ml)。

在本发明提供的纯化方法中，步骤(4)中，以洗涤液的总体积计，其中有机溶剂的体积百分比为0-40％，优选20％-40％。

在本发明提供的纯化方法中，步骤(5)中，以洗脱液的总体积计，其中有机溶剂的体积百分比为40-90％，优选40-60％。

在本发明提供的纯化方法中，所述的大孔吸附树脂选自：由苯乙烯与二乙烯苯聚合而成的非极性的芳香族吸附树脂；或具有甲基丙烯酸酯单元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸附树脂。

在另一优选例中，所述的吸附树脂选自：XAD-1、XAD-2、XAD-3、XAD-4、XAD-5、XAD-16、XAD-16HP、HP-10、HP-20、HP-20ss、HP-21、HP-30、HP-40、HP-50、SP-825、SP-850、SP-70、SP-700、SP-207、SP207ss、XAD-6、XAD-7、XAD-7HP、XAD-8、HP-2MG、或它们的混合物。

在本发明提供的纯化方法中，所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、丁酮、或它们的混合物。

据此，本发明提供了一种不需要大量溶媒，不使用硅胶的纯化方法，克服了现有技术中存在的缺陷，同时提高了式I化合物的纯度。

附图说明

图1为实施例1含式I化合物的抽提液的HPLC图谱。

图2为实施例4纯化后式I化合物的HPLC图谱。