[发明专利]一种齐墩果酸三糖皂苷类成分的制备工艺

权利要求书

1.3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用水或0.1-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加热回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液，滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL，无醇味，0-4℃冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物；

第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入碱性溶液调到PH10-13，加热沸腾4-10小时，每30-60分钟测PH，保持在PH10-13，放冷，加酸性溶液，调PH 3-7，离心，去沉淀，即得西南银莲花提取物水解液；

第三步，西南银莲花提取物水解液，经过大孔树脂吸附，依次用水、30-40％乙醇、50-80％乙醇、95％乙醇洗脱，收集50-80％乙醇洗脱部分，蒸干，用水溶解后经过小孔树脂吸附，收集甲醇-水6∶4洗脱部分，即得XNY58组分；

第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱，用甲醇和水(3∶7-10∶0)的混合液进行梯度洗脱，梯度洗脱液依次有五组，其体积配比分别为

第一组甲醇5份∶水5份；

第二组甲醇6份∶水4份；

第三组甲醇7份∶水3份；

第四组甲醇8份∶水2份；

第五组甲醇9份∶水1份；

第五步、收集甲醇8份∶水2份的洗脱部分，经Sephadex LH-20柱甲醇-水7∶3洗脱，经ODS动态轴向色谱柱制备，甲醇-水8∶2洗脱得到化合物I，经对照品比较及LC/MS/MS测试，该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。

2.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，其特征是：其中的碱性溶液包括氢氧化钠、氢氧化钾。

3.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，其特征是：其中的酸性溶液包括盐酸、硫酸。

4.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，其特征是：其中大孔树脂包括非极性大孔吸附树脂(HPD100、HPD-300、HPD700、D101)、弱极性大孔吸附树脂(HPD-722、AB-8)、中极性大孔吸附树脂(HPD-450、HPD750、HPD-800、DM-130、ADS-17)、极性大孔吸附树脂(HPD-600、NKA-9) 和小孔树脂等任何一种类型。

5.权利要求1的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，其特征是：其中用于洗脱大孔树脂的洗脱液依次为水、30％乙醇洗脱、50～80％乙醇洗脱、95％乙醇洗脱，收集50～80％乙醇洗脱部分。

6.权利要求1至5中任一项的3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷，其特征是：含量大于95％。

7.3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的结构见附图。