[发明专利]利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法

权利要求书

1.一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于包括以下步骤：培养黄芩毛状根，利用培养后的黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷。

2.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于：所述培养黄芩毛状根的培养基为改良MS培养基，该改良MS培养基包含大量元素、微量元素、铁盐和有机成分，pH为5.4～6.0；

所述大量元素包含950mg/L的KNO₃、42.5mg/L的KH₂PO₄、185mg/L的MgSO₄·7H₂O、220mg/L的CaCl₂·2H₂O和500mg/L的水解乳蛋白；

所述微量元素包含0.83mg/L的KI、6.2mg/L的H₃BO₃、22.3mg/L的MnSO₄·4H₂O、8.6mg/L的ZnSO₄·7H₂O、0.25mg/L的Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L的CuSO₄·5H₂O和0.025mg/L的CoCl₂；

所述铁盐包含18.65mg/L的Na₂·EDTA和13.9mg/L的FeSO₄·7H₂O；

所述有机成分包含100mg/L的肌醇、2mg/L的甘氨酸、0.1mg/L的盐酸硫胺素、0.5mg/L盐酸吡哆醇和0.5mg/L的烟酸。

3.根据权利要求2所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于：所述培养黄芩毛状根的方法为：

1)将黄芩毛状根以4-5g/L接种于黄芩毛状根种子培养基中于100～150r/min下避光震荡培养18～20天得黄芩毛状根种子，培养的温度25～28℃，黄芩毛状根种子培养基为添加40-50g/L蔗糖的改良MS培养基；

2)将黄芩毛状根种子以4-5g/L接种于培养基中于100～150r/min下避光震荡培养20～30天，培养的温度为25～28℃，培养基为添加30-60g/L蔗糖、葡萄糖或其混合物和0.4mmol/L苯丙氨酸的改良MS培养基。

4.根据权利要求1或3所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于：所述转化的时间为30～40h，转化时的温度为20～28℃。

5.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于：所述对苯二酚在加入前用体积分数70％的乙醇水溶液进行溶解，溶解比例为每1-5mL乙醇水溶液溶解20mg对苯二酚。

6.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法，其特征在于：所述对苯二酚的加入量为每100mL黄芩毛状根的培养液中加入15～25mg。