[发明专利]一种昆明山海棠药材的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材的质量检测方法，特别是涉及昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法。 

背景技术

色谱指纹图谱用于中药质量检测符合中药复杂的多组分特点，在某些化学结构尚不清楚的情况下，能够较为全面地控制中药材的稳定性。与传统鉴别相比较，指纹图谱能够更好的反映中药(植物药)的整体质量信息，借助现代分析仪器等先进手段进行分析，方便易行。 

美国FDA及WHO通过了“对植物药允许以指纹图谱判断上市产品批间样品的一致性”的规定。近年来，日、韩、德等国的植物药研究也广泛应用指纹图谱进行质量检测。由此可见，指纹图谱已成为控制植物药的有效控制手段，广泛得到应用。 

昆明山海棠为卫矛科雷公藤属多年生落叶藤本灌木[Tripterygium hypoglaucum(Levl)Hutch]，又名粉背雷公藤、火把花、紫金皮等，中医用于杀虫、舒筋活络、清热解毒、祛风除湿等。国内外研究相继发现昆明山海棠在众多自身免疫性疾病(如红斑狼疮等)、肿瘤、白血病、以及艾滋病等方面的重要价值。但目前，现有方法仅上海市药材标准和广东省中药材标准有收载昆明山海棠的质量检测方法。对昆明山海棠药材的质量检测手段仅限于简单的性状和显微鉴别，没有对主要有效成分的定性或定量的鉴别，质量检测方法及其缺乏。本发明建立了昆明山海棠药材的指纹图谱的鉴别方法，通过药材的指纹图谱与标准指纹图谱对比，以确保药材质量稳定、可控。 

发明内容

本发明的目的在于公开昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法。 

本发明目的是通过如下技术方案实现的： 

本发明昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法，该方法包括如下步骤： 

A、供试品溶液制备 

称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末0.5～1.5重量份，置锥形 瓶中，加入甲醇60～100体积份，置30～50℃超声水浴中超声提取0.5～1.5小时，室温放置0.5～1.5小时，在4000转/分钟条件下离心5～15分钟，取出，倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干，残渣用甲醇4体积份溶解，在冰箱1～5℃下放置0.5～1.5小时，取出，在10000转/分钟条件下离心5分钟，上清液用甲醇5体积份稀释，稀释液用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液； 

B、对照品溶液制备 

取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品，分别用甲醇配成每体积份含0.00005～0.00015重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液，作为对照品溶液； 

C、色谱条件 

色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪；色谱柱Symmetry C18(250×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-甲醇-0.02％磷酸溶液梯度洗脱；柱温10～30℃；流速1.0ml/分钟；检测波长210nm； 

D、测定法 

吸取供试品溶液与对照品溶液各0.00001体积份，注入液相色谱仪，测定，即得；昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰，共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰，其中36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰，各峰号相对保留时间为：5号峰0.140～0.160、24号峰0.560～0.580、32号峰0.820～0.840、36号峰1、37号峰1.030～1.050。 

本发明昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法，优选如下步骤： 

A、供试品溶液制备 

称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末1重量份，置锥形瓶中，加入甲醇80体积份，置40℃超声水浴中超声提取1小时，室温放置1小时，在4000转/分钟条件下离心10分钟，取出，倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干，残渣用甲醇4体积份溶解，在冰箱1～5℃下放置1小时，取出，在10000转/分钟条件下离心5分钟，上清液用甲醇5体积份稀释，稀释液用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液； 

B、对照品溶液制备 

取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品，分别用甲醇配 成每体积份含0.0001重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液，作为对照品溶液； 

C、色谱条件 

色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪；色谱柱Symmetry C18(250×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-甲醇-0.02％磷酸溶液梯度洗脱；柱温20℃；流速1.0ml/分钟；检测波长210nm； 

D、测定法