[发明专利]莱氏野村菌微菌核诱导产生的方法

权利要求书

1.一种莱氏野村菌微菌核诱导产生的方法，其特征在于按以下步骤进行：

（1）把莱氏野村菌菌种活化，待用；

（2）接种体制备：将活化的野村菌接种于SMAY培养基上，在25～28℃下连续光照培养144-192h，用0.1%～0.5%的Tween80水溶液将平板上的孢子或菌丝体洗下，配制莱氏野村菌接种体悬浮液；

（3）液体发酵诱导：将接种体加入诱导培养液中进行发酵培养，将所得的发酵液过滤，弃去上清液，得到沉淀微菌核和菌体，干燥，保存；

所述诱导培养液单位体积内所含有的各种原料干物质重量如下：葡萄糖 10~50g/L，酵母膏5～10g/L，蛋白胨5～10g/L，KH₂PO₄ 3～5g/L，CaCl₂.2H₂O 0.7～0.9g/L，MgSO₄.7H₂O 0.5～0.7g/L，FeSO₄.7H₂O 0.1～0.2g/L，CoCl₂.6H₂O 35～40mg/L，MnSO₄.H₂O 15～20mg/L，ZnSO₄.7H₂O 14～20mg/L，脱离子水配制；

所述液体发酵的工艺条件为：培养基pH=5.4～6.5，温度为23~28℃，摇床转速为200～250rpm或者发酵罐转速为80～100rpm，培养时间为144～192h。

2.根据权利要求1所述诱导莱氏野村菌产生微菌核的方法，其特征在于：所述诱导培养液单位体积内所含有的各种原料干物质重量如下：葡萄糖 10～40g/L、酵母浸膏 5～8g/L、蛋白胨 5~8g/L、KH₂PO₄ 3~4g/L、Cacl₂.2H₂O 0.7~0.8g/L、MgSO₄.7H₂O 0.6~0.7g/L、FeSO₄.7H₂O 0.1~0.2g/L、CoCl₂.6H2O 36~37mg/L、MnSO₄.H₂O 16~18mg/L、ZnSO₄.7H₂O 16~18mg/L，脱离子水配制。

3.根据权利要求1所述诱导莱氏野村菌产生微菌核的方法，其特征在于：所述液体发酵的工艺条件为：培养基pH=5.5～6.0，温度为25~26℃，摇床转速为220~250rpm或者发酵罐转速为80~100rmp,培养时间为150～192h。

4.根据权利要求1所述诱导莱氏野村菌产生微菌核的方法，其特征在于：所得到的沉淀微菌核和菌体可以用冻干粉保存。