[发明专利]一种从油茶饼中提取茶皂素的方法

说明书

 

技术领域

本发明属于天然产物分离纯化领域，具体地说涉及一种从油茶饼中提取纯化高纯度茶皂素的方法。

 

背景技术

油茶（Camellia oleifera Abel）又名茶籽树、油茶树、白花茶，属山茶科山茶属，是我国南方丘陵地区的一种重要油料植物，主要分布在湖南、江西、广西等省。油茶籽是油茶树的种子，而油茶饼则是经压榨之后的油茶籽副产品，其中含有大量的茶皂素。茶皂素（Tea saponin）,又称茶皂甙、茶皂苷、皂角苷，是一种结构为齐墩果烷型五环三萜类皂苷的化合物，由七种配基、四种糖体和两种有机酸构成。茶皂素是一种优良的非离子型表面活性剂，在分散、湿润、发泡、稳泡、去污等方面具有良好的活性功能。茶皂素的另一重要特性是它的生理活性，具有明显的抗炎、抗渗透、祛痰、止咳、镇痛、杀菌、杀虫及促进植物生长等多种生理功效。因此，茶皂素在工业、农业、医药、食品等领域有着广泛的用途。

现有文献表明，茶皂素的提取方法是目前研究茶籽粕资源利用的热点之一。茶皂素的传统提取方法主要是浸提法，如水提法，有机溶剂浸提法，随着工艺的改进，又有了超声波辅助提取法、微波辅助提取法等，超声波目前广泛应用于植物有效成分的提取，具有高提取率，提取时间短的优点，但目前超声波辅助提取茶皂素的报道比较少，且研究内容并不完善。

 

发明内容

本发明提供了一种从油茶饼中制取高纯度茶皂素的方法。本发明方法提取茶皂素时间短，效率高，所得的茶皂素纯度高。

本发明采用的技术方案如下：

一种从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于：具体包括以下步骤： 

（1）原料预处理：

a、将取油后的油茶饼在40-60℃条件下真空干燥后，粉碎至粉末状；

b、称取一定量的油茶饼粉末于容器中，加入油茶饼粉末重量的4-5倍石油醚，搅拌充分后，加热回流4-6小时；

c、然后过滤分离，挥干滤渣中的石油醚，得到完全脱脂的油茶饼粕；

（2）超声辅助提取：

a、将一定量的完全脱脂的油茶饼粕投入容器中，按料液比1:（3-9）加入70-85%甲醇溶液，在30-70℃条件下，超声辅助提取30-65min；

b、所得提取液经过滤分离，减压浓缩得浸膏；

（3）萃取样液：

a、将浓缩所得的浸膏用蒸馏水稀释，再加入正丁醇的饱和水溶液萃取多次，收集有机相并合并；

b、将收集合并的萃取液减压浓缩，在40-60℃下干燥得红棕色固体，即为粗茶皂素；

（4）柱层析纯化：

a、将干燥的粗茶皂素溶解于蒸馏水中；

b、采用AB-8大孔树脂对粗茶皂素溶液进行纯化，粗茶皂素液上柱，控制流速为1-5BV/hr，上样结束后，静置1-4h，再用蒸馏水洗去水溶性杂质；

c、然后用不同浓度的乙醇溶液洗脱树脂，洗脱时按照浓度由低到高顺序分次洗脱，并分别接收洗脱液； 

（5）洗脱液的处理：

a、用HPCE检测法检测收集的洗脱液纯度，将纯度较高的组份合并，弃去纯度低的洗脱液； 

b、将收集的纯度较高的洗脱液减压浓缩，回收溶剂乙醇，得到纯度高茶皂素产品。

所述的从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于：步骤（4）中所述的洗脱树脂的乙醇溶液的浓度范围为30%-90% 。

所述的从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于：步骤（5）中所述的HPCE检测法，具体要求为：缓冲溶液为30mmol/L的硼酸硼砂溶液，pH值为8.0，检测波长210nm，毛细管柱温25℃，检测电压20KV。

本发明具有以下优点：

（1）    利用油茶饼作为原料，提取分离高纯度的茶皂素。油茶饼粕资源丰富，高纯度茶皂素的制取，既“变废为宝”，又充分提高了油茶资源的利用率，增加效益；

（2）    提取工艺简单，容易控制，方法可靠；

（3）    提取效率高，稳定性好；

（4）    经过提取分离，尤其是采用柱层析大孔树脂纯化后，产品纯度较高，可达83%以上。

本发明以油茶饼为原料，为高纯度茶皂素的制取提供了理论依据，为油茶粕的资源综合利用提供了一定的参考价值，本发明在工业化实施后，对油茶产业的发展及资源深度开发利用具有深远意义。

 

具体实施方式

现以实验室实施为例，非限定实施例叙述如下：

将油茶饼原料在40-60℃真空条件下干燥，粉碎。取200g油茶饼粉末，用石油醚加热回流6-10h，去除油脂，分离，过滤，并挥干残余溶剂，获得完全脱脂的油茶饼粕粉原料，加入800ml的80%甲醇溶液， 在50℃条件下，超声辅助提取45min，提取液经过滤分离后，减压浓缩得浸膏。浸膏溶解于 500mL蒸馏水中，同时，加入600mL饱和正丁醇水溶液，分三次对其进行萃取，取正丁醇层，合并萃取液，将萃取液减压浓缩至干，40-60℃下干燥得红棕色固体，即为粗茶皂素。称取5g粗茶皂素（树脂量的1/20-1/40的粗提取物）溶解于500mL蒸馏水中，制成上柱液。湿法装柱，采用AB-8大孔树脂对粗茶皂素进行纯化，粗茶皂素液上柱后，控制流速为1-5BV/hr，上样结束后，静置3h，再用蒸馏水洗去水溶性杂质，然后分别用浓度为30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液依次洗脱，分步接收梯度洗脱段洗脱液，收集量达100mL时，用HPCE法测定茶皂素纯度，用HPCE法（缓冲溶液为30mmol/L的硼酸硼砂溶液，pH值为8.0，检测波长210nm，毛细管柱温25℃，检测电压20KV）测定茶皂素纯度，合并纯度较高的洗脱液，减压回收，并挥去全部溶剂乙醇，所得干物质即为纯度较高的茶皂素，测得纯度为83.23%。