[发明专利]一种无毒棉粕动物饲料的制备方法

权利要求书

1.一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

1)一级菌种的制备：

a、将热带假丝酵母菌、产朊假丝酵母菌、啤酒酵母菌分别接种至酵母菌培养基中，于30～37℃，振荡培养24～36h，制得假丝酵母菌一级菌种、产朊假丝酵母菌一级菌种、啤酒酵母菌一级菌种；

b、将枯草芽孢杆菌接种至枯草芽孢杆菌培养基中，在30～37℃，振荡培养24～36h，制得枯草芽孢杆菌一级菌种；

c、将乳杆菌接种乳杆菌培养基中，在30～37℃，静置培养48～60h，制得乳杆菌一级菌种；

2)二级菌种的制备：

a、将步骤1)中制备的假丝酵母菌一级菌种、产朊假丝酵母菌一级菌种、啤酒酵母菌一级菌种和枯草芽孢杆菌一级菌种以2～2.5wt％的接种量，分别接种至固体培养基中，于30～37℃，培养48～72h，制得假丝酵母菌二级菌种、产朊假丝酵母菌二级菌种、啤酒酵母菌二级菌种和枯草芽孢杆菌二级菌种；

b、将步骤1)中制备的乳杆菌一级菌种接种乳杆菌培养基中，在30～37℃，静置培养48～60h，制得的乳杆菌二级菌种。

3)发酵底物的制备

称取下述质量百分比的原料：棉粕75～80％、豆粕10～15％、玉米粉4～5％、糖蜜3～4％、磷酸二氢钾0.35～0.45％、碳酸钙0.4～0.5％、酸性木聚糖酶0.08～0.1％、酸性蛋白酶0.04～0.05％混合制得发酵底物；

4)发酵底物接种

将步骤2)中的制备的假丝酵母菌二级菌种、产朊假丝酵母菌二级菌种、啤酒酵母菌二级菌种和枯草芽孢杆菌二级菌种以重量比为3∶1∶1∶2混合均匀后，以2～2.5％的接种量接种至步骤3)所得的发酵底物中；乳杆菌二级菌种以0.4～0.5％的接种量接种至步骤3)所得的发酵底物中，再调节含水量至45～50％，混合均匀，发酵3～6天后，干燥即得。

2.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的酵母菌种子培养基中各成分的浓度为：蛋白胨4.5～5.5g/L，酵母膏14～16g/L，氯化钠3.5～4.5g/L，葡萄糖9～11g/L。

3.根据权利要求2所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的酵母菌种子培养基和枯草芽孢杆菌种子培养基的pH均为6.5～7.5。

4.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌种子培养基中各成分的浓度为：蛋白胨9～11g/L，牛肉膏4.5～5.5g/L，葡萄糖9～11g/L，氯化钠4.5～5.5g/L。

5.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的乳杆菌种子培养基中各成分的浓度为：蛋白胨3.5～4.5g/L，葡萄糖3.5～4.5g/L，氯化钠2.5～3.5g/L，磷酸二氢钾2.5～3.5g/L，磷酸氢二钾2.5～3.5g/L，淀粉1.8～2.2g/L，氯化镁0.2g/L，硫酸钙0.05g/L。

6.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的固体培养基干料由下述重量分的原料组成：豆粕60～65％，棉粕25～30％，玉米粉4～5％，糖蜜4～5％，硫酸镁0.03～0.05％。

7.根据权利要求6所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的固体培养基的含水量为40～45％。

8.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的酸性木聚糖酶的酶活力为80,000IU/g。

9.根据权利要求1所述的一种无毒棉粕动物饲料的制备方法，其特征在于，所述的酸性蛋白酶的酶活力为100,000IU/g。