[发明专利]柴胡皂苷α处理神经干细胞为神经元样细胞及其试剂盒的研制、用于神经系统疾病的组合物有效
申请号: | 201110307966.6 | 申请日: | 2011-10-12 |
公开(公告)号: | CN102363767A | 公开(公告)日: | 2012-02-29 |
发明(设计)人: | 沈丽;黄启明;郝丽敏;王振光 | 申请(专利权)人: | 北京弘润天源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0793 | 分类号: | C12N5/0793;C12N5/0797;A61K35/30;A61P25/00;A61P25/16 |
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地址: | 100085 北京市海淀区上*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 柴胡 皂苷 处理 神经 干细胞 神经元 细胞 及其 试剂盒 研制 用于 系统疾病 组合 | ||
1.一种人神经干细胞分化成神经元样细胞及其增殖的分化培养基,所述分化培养基包括液体基础培养基,其特征在于,以所述液体基础培养基的体积为基准,所述选择培养基还含有1-500ug/mL的柴胡皂苷α、1-20体积%的胎牛血清、5-200ng/mL的人表皮生长因子和5-200ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子。
2.根据权利要求1所述的分化培养基,其中,以所述液体基础培养基的体积为基准,所述分化培养基还含有5-300ug/mL的柴胡皂苷α、5-15体积%的胎牛血清、10-100ng/mL的人表皮生长因子和10-100ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子。
3.根据权利要求2所述的分化培养基,其中,以所述液体基础培养基的体积为基准,所述选择培养基还含有50-200ug/mL的柴胡皂苷α、5-10体积%的胎牛血清、20-50ng/mL的人表皮生长因子和20-50ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子。
4.根据权利要求1所述的分化培养基,其中,所述液体基础培养基选自神经元细胞培养基(Neuronal Medium,NM)、BME细胞培养基、杜尔贝可改良伊格尔细胞培养基、DMEM/F12细胞培养基、Fischer′s细胞培养基、IMDM细胞培养基、199细胞培养基、MEM细胞培养基、F10细胞培养基、F12细胞培养基和1640细胞培养基中的一种或几种。
5.一种将神经干细胞分化成神经元样细胞的方法,其特征在于,所述方法使用权利要求1-5中任意一项所述的分化培养基培养所述的人神经干细胞。
6.由权利要求1-5所述的方法得到的神经元样细胞。
7.一种制备权利要求6所述的柴胡皂苷α分化试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
1)神经干细胞基础培养基;
2)柴胡皂苷α;
3)细胞因子(人表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子);
4)消化细胞的酶以及;
5)使用说明书。
8.一种用于治疗神经系统疾病的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物包括权利要求6-7中任意一项所述的方法获得的神经元样细胞,以及和药学上可接受的载体或赋形剂。
9.根据权利要求8所述的药物组合物,其中,所述药物组合物为注射液,所述注射液包括药学上可接受的载体,以及以所述注射液体积为基准,1×105至1×108个/毫升的权利要求6-7中任意一项所述的方法获得的神经元样细胞。
10.根据权利要求9所述的药物组合物,其中,所述注射液包括以所述注射液体积为基准,5×105至1×107个/毫升的权利要求6-7中任意一项所述的方法获得的神经元样细胞。
11.根据权利要求9所述的药物组合物,其中,所述药学上可接受的载体为生理盐水。
12.根据权利要求8所述的药物组合物,其中,所述神经系统疾病选自脑卒中、脑性瘫痪、脑损伤、脑出血、骨髓侧索硬化症和帕金森病等中的一种或几种。
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