[发明专利]一种赤霉素混合物及其生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及赤霉素（Gibberella fujikuroi）以及通过发酵培养而生产赤霉素GA₄₊₇的方法，具体涉及一种赤霉素混合物，以及以新的变异菌株为对象发酵培养生产赤霉素GA₄₊₇的方法。

背景技术

    赤霉素是指种类众多的一族密切相关的四环三萜系化合物，是一族很重要的具有生物活性的内源植物生长调节剂。不同的赤霉素可促进植物不同部位的生长，GA₃主要是促进植物干和叶子生长，而GA₄和GA₇则主要是促进开花和拉伸果实，GA₄₊₇最重要的应用是可以减轻某些苹果锈病的严重程度和发生率，但如果制剂中含有GA₃的话，GA₃可以导致果树花蕾形成减少。在现有的合成赤霉素的技术中，GA₃是主要的赤霉素组分，而GA₄和GA₇的含量则较低，因此，人们希望能有一种GA₄₊₇为主要赤霉素组分的赤霉素生产方法。

发明内容

    本发明的目的是针对上面所述缺陷，提供一种赤霉素混合物中主要成分是GA₄和GA₇的赤霉素混合物。

    本发明的另一目的是提供一种赤霉素混合物的生产方法。

    本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的。

    一种赤霉素混合物，其特征在于：混合物中包含至少50%的GA₄₊₇；GA₄/GA₇约为2∶1；混合物的效价至少为900mg/L。

    一种赤霉素混合物，其特征是，混合物中优选包含70-90%的GA₄₊₇；GA₄/GA₇优选为5-6∶1；混合物的效价优选为1100mg/L以上。

    一种赤霉素混合物的生产方法，其特征是包含以下步骤：制备好变异菌株Gibberella fujikuroi NRF-0802（“变异菌株Gibberella fujikuroi NRF-0802”已于2011年8月4日在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，简称“CGMCC”进行生物保藏；保藏编号为：CGMCC No.5112；分类命名：藤仓赤霉菌；拉丁文学名：Gibberella fujikuroi）种子，然后接种到高碳源和相对低氮源的灭菌后的复合发酵培养基中；培养上述培养基4-15天后将菌丝体同发酵液分离；从发酵液中提取GA混合物后得到至少含有50%GA₄₊₇的赤霉素混合物。

    上述含有50%GA₄₊₇的赤霉素混合物经过将GA₃从GA₄/GA₇混合物中分离出来后可得到含有70-90%GA₄₊₇的赤霉素混合物。

    所述变异菌株Gibberella fujikuroi NRF-0802生长在土豆葡萄糖琼脂（Potato-Dextrose Agar）上的气生菌丝形成高0.2-0.7厘米、直径0.3-0.9厘米，白色或淡红色的菌落，还可能产生桔色/浅红色/浅黄色的色素。

    所述变异菌株Gibberella fujikuroi NRF-0802的发酵温度为20-40℃，优选温度为25-34℃，最优温度为28-32℃；发酵时pH值为3.0-7.0，优选pH值为5.0-7.0，最优pH值为5.5-7.0；发酵时间为4-15天。

变异菌株Gibberella fujikuroi NRF-0802发酵可以在一系列的液体和固体培养基上进行，适合次级代谢产物如抗生素发酵的培养基对该菌株也适合。总体而言，这些培养基含有各种不同的可以被真菌利用的碳源、氮源以及各种浓度的无机盐，还可能含有各种对发酵产物产生至关重要的微量元素等。

合适的碳源包括各种糖，如葡萄糖、葡聚糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖以及糊精、玉米粉、燕麦粉、淀粉、植物油、糖蜜、脱脂乳等都是培养基中可吸收碳的来源。培养基中确切地碳源的量部分取决于培养基中的其他成分，但浓度一般为培养基总重量的5-20%（w/w）。这些碳源可以单独使用或者作为复合碳源用在培养基中。