[发明专利]结直肠癌特异性的基因-病毒治疗药物

说明书

技术领域

本发明属于癌症的靶向基因-病毒治疗(Cancer Targeting Gene-Viro-Therapy，CTGVT)领域，具体涉及结直肠癌特异性的靶向基因-病毒治疗(Cancer TargetingGene-Viro-Therapy Specific for Colorectal Cancer，CTGVT-CRC)，更具体的，是关于一种结直肠癌特异性基因-病毒治疗药物。

背景技术

1999-2001年，刘新垣创建了一种癌症治疗策略，叫癌症的靶向基因-病毒治疗(Cancer Targeting Gene-Viro-Thearpy，CTGVT)，它是将抗癌基因插入到溶瘤病毒(oncolytic virus，OV)而成，故CTGVT策略即OV-(gene)策略或Gene ArmedOncolytic Virus Therapy(GAOVT)策略，后者也是OV-(gene)，CTGVT(GAOVT)把基因治疗和溶瘤病毒治疗各自的优势结合起来了，因为溶瘤病毒本身就有抗癌作用，又可能特异性地在癌细胞中复制数百倍，插入其中的抗癌基因也可随之复制数百倍，故其抗癌效果大大地增加，既比相应单独基因治疗好很多，也比相应单独溶瘤病毒治疗好很多，故现在成为国际热点课题。基因治疗，虽然2009年被Science评为全球十大科学成果之一，但那都是对单基因缺乏的遗传病所获得的成果，对癌症这样复杂又是多基因突变的疾病，基因治疗的抗癌效果，远不如CTGVT(GAOVT)的抗癌效果，基因治疗为Ad-(gene)，其中所用的载体Ad无癌症靶向性，在癌细胞中无复制能力(即非复制型Ad)，故其抗癌效果，远远不如CTGVT。

如图5所示，腺病毒有早期基因有E1、E2、E3、E4及晚期基因L1、L2、L3、L4、L5。其中E1又可分为E1A、E1B，最重要的是E1A，其次是E1B。E1A的天然启动子被结直肠癌特异性的启动子替换，则此腺病毒只能在结直肠癌细胞中感染复制。

溶瘤病毒(Oncolytic Virus，OV)，是指在肿瘤中特异表达和感染复制的病毒，有癌细胞靶向性，还能复制，但非结直肠癌特异性。任何病毒(Adenovirus(腺病毒)，Simplex Herpes Virus(HSV-1)(疱疹病毒)，Poxvirus(痘苗病毒))经改造后均可构成为OV。溶瘤病毒携带gene则为OV-gene，但Ad-gene即基因治疗(其中Ad无靶向性，无复制倍增能力)。

发明内容

在CTGVT，即OV-(gene)的构建与应用中，OV(Oncolytic Virus)主要决定其靶向性，可用各式各样的方法加以构建，使它产生不同靶向性，本申请只涉及特异性靶向结直肠癌领域，目的是提供一种结直肠癌特异性的基因-病毒治疗药物，CTGVT-CRC及其应用。

Gene主要决定杀伤性，光OV的杀伤作用有限，故需加杀伤基因以增强其抗癌作用，构成OV-(gene)，即CTGVT(GAOVT)，才能构成很强的抗癌药物，对CTGVT还需要更多改进，如将两个CTGVT合用，其抗癌作用更强，常可把移植性肿瘤基因基本上消灭光。此外，如专门靶向癌症干细胞，则有根除癌症和彻底消灭癌症的可能性。

本发明具体采用如下技术方案：

本发明是用结直肠癌特异性启动子CEA替换E1A本身的天然启动子，则此腺病毒变成了对结直肠癌特异性溶瘤腺病毒，可简写为(CRC)·OncoAd，即一种靶向结直肠癌的OV载体，这是本专利的根本要求，此外，对E1B的表达也可改造，如缺失其中55KD，则为E1B(Δ55)，Δ为缺失之意，称ZD55，也可写成D55；E1B有两个基因，即19KD与55KD基因，如这两个基因双缺失则为ΔE1B。Ad·E1B的天然启动子也可用HIF(低氧诱导因子)取代，构成Ad·HIF·E1B，总的要求是构成Ad·CEA·E1A·∽E1B(∽E1B，表示可对E1B进行的任意改造)。