[发明专利]一种菊苣酸及其制备方法和用途

说明书

技术领域  

本发明涉及一种化合物，具体来说，是菊苣酸，本发明还涉及该化合物的制备和用途。

背景技术

急性脑梗塞是神经内科的常见病、多发病,其发病率和致残率均相当高。已有许多资料表明,器官缺血后血流量的恢复在某些情况下可加重组织器官的损伤,即缺血/再灌注损伤,所以,保护缺血/再灌注损伤是治疗脑缺血性疾病的重要环节。经检索未见该物质用于制备治疗脑梗塞药物中的应用，本研究在建立大鼠大脑中动脉栓死性脑缺血再灌注损伤模型,探讨菊苣酸对脑缺血/再灌注损伤的预防和治疗作用,为扩大菊苣酸的临床应用提供实验依据。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种化合物菊苣酸及其新的制备方法。

本发明的另一个目的是提供该化合物菊苣酸的用途，包括在制备治疗脑梗塞疾病药物，尤其是急性脑缺血的药物的用途；在测定抱茎苦荬菜有效成分含量中的用途和在测定苦碟子注射液有效成分含量中的用途。

本发明所述的化合物是菊苣酸，为白色针状结晶。结构式为:

本发明所述化合物的提取分离方法为:

取抱茎苦荬菜药材，加水煎煮两次，合并煎煮液，浓缩至每1ml相当于原生药1.0g，在搅拌下加20％氢氧化钙乳调节pH值至12，放置8小时，离心，离心沉淀物称重，悬浮于6.3倍量95％乙醇中，使含醇量达90％，加20％硫酸溶液调节pH值至2.9，充分搅拌使反应完全，离心，上清液加20％氢氧化钠溶液中和pH值至8.0，过滤，滤液回收乙醇，加1.0倍量乙醚脱脂两次，水液经过大孔树脂D101处理，收集水洗液，调节pH值至2.5，再用石油醚（30-60℃）萃取3次，合并萃取液，减压（50℃）挥干溶剂，得到粗酚酸提取物，干法上聚酰胺柱，以15:5（ml/ml）的乙醇一冰醋酸溶液洗脱，应用TLC法监测，截取第二组分，挥干溶剂，残渣经甲醇处理，应用1500×200mm大型高压制备柱，以乙腈0.4％磷酸溶液（ml/ml）（16:84）为流动相，进行分离制备，得无色针状结晶。经HPLC分析，证明纯度均在98.0％以上。

该无色针状结晶可溶于甲醇，易溶于甲醇一水混合溶剂，三氯化铁反应呈阳性，且1.0%水溶液酸性较强，pH值3.0，提示为酚酸类化合物。

薄层色谱检查:  取上述无色针状结晶适量，加甲醇制成每1m1含0.2mg的溶液，作为供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液5μl，点于硅胶G预制板，以氯仿-甲醇-甲酸(7:3:1)为展开剂，展开， 晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，应呈单一的蓝色荧光斑点，表明本品为单一化合物。

结构鉴定方法:

1、仪器和材料

红外光谱用岛津FTIR一8400型傅立叶红外转换分光光度计；紫外吸收光谱用岛津UV-2550紫外分光光度计；质谱用IonSpec HiResESI型质谱仪测定，采用正离子检测；核磁共振Bruker AV600型核磁共振仪测定；薄层层析及柱层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品，溶剂和显色剂均为分析纯。

2、结构鉴定

化合物为白色针状结晶，可溶于甲醇、水，三氯化铁反应呈阳性，水溶液酸性较强，提示可能为酚酸类化合物。

紫外光谱分析:样品的紫外光谱图，在219.50，244.50，327.50处分别显于最大吸收峰，与菊苣酸的紫外图谱基本一致，进一步确认该化合物为菊苣酸。

高分辨质谱:样品的高分辨质谱，[M-1]峰473可知该化合物分子量为474，经检索分子式应为C₂₂H₁₈O₁₂，与菊苣酸分子式相同。

红外吸收光谱检测

IR(KBr)λcm^-1:3600～3050（OH），1745，1718（C=O），1609，1508为苯环吸收。

核磁共振测定

结果见表1。

表1 菊苣酸的NMR测定数据(DMSO)