[发明专利]快速测定白芍中三种芍药苷类化合物含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及快速测定白芍中三种芍药苷类化合物含量的方法，属于中药技术领域。

背景技术

中药白芍为毛茛科植物芍药Paeonia Lactiflora pall.的干燥根，具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳之功效。芍药苷类化合物是白芍中公认的主要活性成分，目前对白芍的质量主要是根据芍药苷含量高低进行控制(2010版《中国药典》(一部)，国家医药科技出版社：96)。

在白芍的使用过程中，硫磺熏蒸作为一种传统的中药材养护方法，其目的是为了让饮片更加美观、在储藏过程中防虫防霉、加快饮片的干燥速度等，具有干燥、增白、防虫、防腐和防霉变等作用，在中药材及饮片的加工贮藏过程中应用普遍。虽然硫磺熏蒸对中药材及饮片的加工贮藏起到了一定的积极作用，但现代研究证明硫磺熏蒸后中药材及饮片的性状多有改变，并且会使其中残留大量的二氧化硫及砷、汞等重金属，对人体具有多种危害；由于二氧化硫是一种强还原剂，可能与中药材中含有酮基、羟基的成分发生化学反应，导致有效成分的损失，因此可能改变药物的性味，降低药物的疗效，从而直接影响中药材和饮片的质量(参见程明等，硫磺熏制在中药材加工和贮藏中的应用探讨[J]，中国中医药信息杂志，2010年，17(5)：18)。国家食品药品监督管理局在2004年曾发文指出硫磺熏蒸的中药材为劣质药材。《中国药典》2005年版(一部)也取消了山药、葛根等中药材的硫熏工艺，并在《中国药典》2008年版增补本中增加了二氧化硫残留量的检测。目前对于中药材及饮片的加工贮藏已不再建议使用硫磺熏蒸的方法。

但是，硫磺熏蒸在白芍药材与饮片的生产加工过程中仍在使用，近年来尤为严重，市场上流通的白芍药材和饮片大多经硫磺熏制。由于产地、加工方法的差异，其中芍药苷的含量差异极大，且产生芍药苷亚硫酸酯等新化学成分，(参见王巧等，加工炮制对白芍化学成分的影响[J]，中国中药杂志，2006年，31(17)：1418)，已严重影响了白芍药材和饮片的质量。

我国在白芍中包括上述三个化合物的8组分含量测定已有文献报道(参见王巧等，加工炮制对白芍化学成分的影响[J]，中国中药杂志，2006年，31(17)：1418)，但这些方法均耗时长，成本高，不适合常规分析。目前尚无针对白芍中三种主要芍药苷类化合物，即芍药苷亚硫酸酯、芍药苷和芍药内酯苷，进行快速含量测定的方法。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种快速测定白芍中三种芍药苷类化合物含量的方法。

本发明通过如下技术方案实现：

一种快速测定白芍中三种芍药苷类化合物含量的方法，其特征是包括如下步骤：

(1)对待测样品进行预处理；

(2)通过高效液相色谱法或超高效液相色谱法测定经预处理后的样品中芍药苷亚硫酸酯、芍药苷和芍药内酯苷的含量。

所述步骤(1)中样品的预处理，是用80％甲醇超声(超声条件：功率240W，频率45Khz)提取30-45分钟。

所述步骤(1)中样品的预处理方法：精密称取待测样品粉末，精密加入80％甲醇，超声提取30分钟(功率240W，频率45Khz)，放冷，再称定重量，用等浓度甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。

上述预处理的待测样品是白芍药材和包括硫磺熏蒸在内的白芍饮片。

80％甲醇是质量浓度。

所述步骤(2)中高效液相色谱法或超高效液相色谱法的色谱条件为：采用C18柱，紫外检测，流动相由A相和B相组成，A相为100％乙腈，B相为磷酸水溶液，采用等度洗脱。

所述C18柱的粒径为1.7～5.0μm，柱内径2.1～4.6mm，柱长为5～25cm；所述紫外检测器的检测波长为230nm；B相的浓度为0.02％～0.03％；A相∶B相体积比为13％～15％∶85％～87％，流速为0.3～1.0ml/min。

B相的浓度最佳为0.02％，体积比最优选为85％。

C18柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C18柱，或Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱。

本发明的优点是：

(1)本发明方法为首次应用于白芍药材、硫磺熏制白芍中芍药苷亚硫酸酯、芍药苷和芍药内酯苷的同时检测与分析。芍药苷和芍药内酯苷是白芍中的主要有效成分，而芍药苷亚硫酸酯是在硫磺熏制过程产生的新化合物。该方法对白芍中芍药苷类成分的检测具有重要指导意义，对新药等关键技术有良好的指导意义，可应用于新药研发质控等多个方面。