[发明专利]日本血吸虫重要抗原的高通量筛选及其在血吸虫病诊断中的应用

权利要求书

1.一种血吸虫阳性抗原，其特征在于，所述抗原选自：

(a)氨基酸序列如SEQ ID NO：1-24所示的多肽：

(b)将SEQ ID NO：1-24氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的具有免疫原性的衍生多肽；

(c)与SEQ ID NO：1-24所示氨基酸序列的同源性≥90％的、具有免疫原性的多肽；或

(d)具有免疫原性的多肽(a)-(c)的片段。

2.如权利要求1所述的阳性抗原，其特征在于，所述抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1-8所示。

3.权利要求1所述阳性抗原的用途，其特征在于，所述抗原用于制备检测血吸虫的试剂或试剂盒。

4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，包括一核苷酸序列，所述核苷酸序列选自下组：

(a)编码如权利要求1所述阳性抗原的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

5.如权利要求4所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码具有SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的抗原。

6.一种载体，其特征在于，该载体含有权利要求4所述的多核苷酸。

7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求6所述的载体或染色体整合有权利要求4所述的多核苷酸。

8.一种血吸虫阳性抗原的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(a)在适合表达的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出血吸虫阳性蛋白抗原。

9.一种检测血吸虫的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：容器或载体；以及位于所述容器内或载体上的如权利要求1所述的阳性抗原。

10.一种检测血吸虫的试剂，其特征在于，所述试剂包括：固相载体以及包被于所述固相载体上的权利要求1所述阳性抗原。

11.一种能与权利要求1所述的血吸虫阳性抗原特异性结合的抗体。

12.一种抗原-抗体复合物，其特征在于，所述的复合物包括：

(i)氨基酸序列如SEQ ID NO：1-8所示的阳性抗原；

(ii)与(i)阳性抗原特异性结合的抗体；

并且所述的抗原和抗体结合在一起。

13.如权利要求12所述的复合物，其特征在于，所述复合物由氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的阳性抗原及其特异性结合的抗体所构成。

14.权利要求12所述的抗原-抗体复合物的用途，其特征在于，所述复合物用于：

(a)制备检测血吸虫的试剂或试剂盒；和

(b)用作检测血吸虫的阳性对照。

15.一种高通量筛选血吸虫抗原的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)将含有信号肽的候选蛋白抗原与标志蛋白GST进行融合表达；

(2)将步骤(1)得到的融合蛋白置于螯合了GSH的多孔板的孔中，从而捕获GST融合蛋白；

(3)将含有血吸虫抗体的血清置于步骤(2)的多孔板的孔中；

(4)筛选形成特异性抗原-抗体复合物的孔，所对应的候选蛋白即为血吸虫阳性抗原。