[发明专利]一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法有效
申请号: | 201110323779.7 | 申请日: | 2011-10-21 |
公开(公告)号: | CN102417894A | 公开(公告)日: | 2012-04-18 |
发明(设计)人: | 裴端卿;王涛 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10 |
代理公司: | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人: | 张明 |
地址: | 510663 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 诱导 生成 多能 干细胞 效率 方法 | ||
1.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Klf4和Sox2的组合,或Oct4、Klf4、c-Myc和Sox2的组合;
b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。
2.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;
b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。
3.根据权利要求2所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;
b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增,所述干细胞培养基包含维生素C。
4.根据权利要求2所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述转录因子和Jhdm1b为具有多能干细胞诱导功能的编码或非编码RNA、蛋白质或多肽。
5.根据权利要求3或4任一项所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述将Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞是以包含能够表达Jhdm1b的载体导入细胞中来实现的。
6.根据权利要求5所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述载体为病毒载体、质粒载体、外随体载体、mRNA载体或直接化学合成。
7.根据权利要求5所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述病毒载体为逆转录病毒,所述逆转录病毒为pMXs载体。
8.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述Jhdm1b是进行去甲基化修饰的多肽。
9.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述哺乳动物的成体细胞为成纤维细胞、神经细胞、造血细胞和神经胶质细胞。
10.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述哺乳动物的成体细胞为小鼠胚胎成纤维细胞。
11.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、将转录因子与Jhdm1b和Jhdm1a转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;
b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。
12.根据权利要求11所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、将转录因子与Jhdm1b和Jhdm1a转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为Oct4;
b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增,所述干细胞培养基包含维生素C。
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