[发明专利]一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法有效

专利信息
申请号: 201110323779.7 申请日: 2011-10-21
公开(公告)号: CN102417894A 公开(公告)日: 2012-04-18
发明(设计)人: 裴端卿;王涛 申请(专利权)人: 中国科学院广州生物医药与健康研究院
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10
代理公司: 深圳市博锐专利事务所 44275 代理人: 张明
地址: 510663 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 诱导 生成 多能 干细胞 效率 方法
【权利要求书】:

1.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:

a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Klf4和Sox2的组合,或Oct4、Klf4、c-Myc和Sox2的组合;

b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。

2.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:

a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;

b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。

3.根据权利要求2所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:

a、将转录因子与Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;

b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增,所述干细胞培养基包含维生素C。

4.根据权利要求2所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述转录因子和Jhdm1b为具有多能干细胞诱导功能的编码或非编码RNA、蛋白质或多肽。

5.根据权利要求3或4任一项所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述将Jhdm1b转入哺乳动物的成体细胞是以包含能够表达Jhdm1b的载体导入细胞中来实现的。

6.根据权利要求5所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述载体为病毒载体、质粒载体、外随体载体、mRNA载体或直接化学合成。

7.根据权利要求5所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述病毒载体为逆转录病毒,所述逆转录病毒为pMXs载体。

8.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述Jhdm1b是进行去甲基化修饰的多肽。

9.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述哺乳动物的成体细胞为成纤维细胞、神经细胞、造血细胞和神经胶质细胞。

10.根据权利要求1所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,所述哺乳动物的成体细胞为小鼠胚胎成纤维细胞。

11.一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:

a、将转录因子与Jhdm1b和Jhdm1a转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为单独的Oct4,或Oct4和Sox2的组合,或Oct4和Klf4的组合,或Oct4和Klf4和Sox2的组合;

b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增。

12.根据权利要求11所述的提高诱导生成多能性干细胞效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:

a、将转录因子与Jhdm1b和Jhdm1a转入哺乳动物的成体细胞,在诱导培养基中培养,所述诱导培养基包含维生素C,诱导获得多能性干细胞克隆,所述转录因子为Oct4;

b、将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增,所述干细胞培养基包含维生素C。

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