[发明专利]具有连续片光源的SPIM显微镜有效
申请号: | 201110326240.7 | 申请日: | 2011-10-24 |
公开(公告)号: | CN102455501B | 公开(公告)日: | 2017-04-12 |
发明(设计)人: | W·克内贝尔;W·奥斯特赖克 | 申请(专利权)人: | 徕卡显微系统复合显微镜有限公司 |
主分类号: | G02B21/06 | 分类号: | G02B21/06;G02B21/36;G01N21/64;G01N21/17 |
代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司11280 | 代理人: | 王勇 |
地址: | 德国韦*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 连续 光源 spim 显微镜 | ||
1.一种SPIM显微镜,包括:
光源(4),其从y方向发送照射光束(5,41)至待成像的物体(2)上;和
照相机(16),其以z方向作为第一检测方向检测从所述物体上发出的荧光和/或反射光,其中z方向沿与y方向基本垂直的方向延伸,
其特征在于,
x扫描仪(12),其通过在x方向上扫描照射光束(5,41)产生连续片光源,其中x方向沿与y方向和z方向基本垂直的方向延伸,且片光源(1)在由x方向和y方向所限定的平面内连续形成;和
照明光学元件,包括提供在照明光束(5,41)的光束路径上的变焦光学元件,该变焦光学元件适于改变照明光束(5,41)的焦距。
2.根据权利要求1所述的SPIM显微镜,其特征在于,光检测器(19)检测由物体(2)发出的位于与y方向相反方向上的检测光,该检测光的方向为第二检测方向,检测光为荧光和/或反射光。
3.根据权利要求2所述的SPIM显微镜,其特征在于,通过SPIM技术在z方向上生成2维宽视场图像的同时,并行生成物体(2)的共焦1维图像,该共焦1维图像为在x方向上延伸的一行。
4.根据权利要求1至3之一所述的SPIM显微镜,其特征在于,第一z扫描仪在z方向上移动物体(2),使得在z方向上在各自照射面内产生多个彼此间隔的连续片光源(1),其中各个片光源(1)和照相机(16)间的距离(L)保持不变。
5.根据权利要求4所述的SPIM显微镜,其特征在于,图像处理单元(28)将与在z方向上彼此间隔一定距离的多个片光源(1)中的每个相关联的连续生成图像合成为三维图像。
6.根据权利要求2和5相结合的SPIM显微镜,其特征在于,通过SPIM技术生成3维图像的同时,并行生成物体(2)的共焦2维图像,该共焦2维图像位于由x方向和z方向所限定的平面内。
7.根据权利要求1或2所述的SPIM显微镜,其特征在于,第二z扫描仪,其相对于物体(2)在z方向上移动照明光束(5,41)用于在z-方向上连续产生多个彼此间隔的片光源(1),和
第三z扫描仪,其根据第二z扫描仪在z方向上对照明光束(5,41)的偏转跟踪检测光束路径(11),使得片光源(1)和照相机(16)间的距离保持不变。
8.根据权利要求7所述的SPIM显微镜,其特征在于,图像处理单元(28)将与在z方向上彼此间隔一定距离的多个片光源(1)相关联的连续生成的图像合成为三维图像。
9.根据权利要求2和8相结合的SPIM显微镜,其特征在于,通过SPIM技术生成3维图像的同时,并行生成物体(2)的共焦2维图像,该共焦2维图像位于由x方向和z方向所限定的平面内。
10.根据前述权利要求之一所述的SPIM显微镜,其特征在于,适于改变照明光束(5,41)焦距的变焦光学元件(13)为光学变焦的,具有彼此间能机械移动的透镜组。
11.根据权利要求10所述的SPIM显微镜,其特征在于,通过变焦光学元件(13),能够通过改变数值孔径来扩大或缩短照明光束(5,41)的焦距,且由此扩大或缩短在y照射方向上由片光源(1)照射的区域的长度。
12.根据前述权利要求之一所述的SPIM显微镜,其特征在于电子变焦元件,其适于改变x方向上的扫描长度。
13.根据权利要求12所述的SPIM显微镜,其特征在于,通过电子变焦元件使x方向上的图像像素数量保持不变,且该数量与x方向上已选定的扫描长度无关。
14.根据权利要求4至13之一所述的SPIM显微镜,其特征在于,通过电子变焦元件改变z方向上的扫描长度,且沿该z方向连续生成多个彼此间隔的片光源(1)。
15.根据权利要求14所述的SPIM显微镜,其特征在于,通过电子变焦元件使z方向上彼此间隔的片光源(1)的数量保持不变,且该数量与z方向上已选定的扫描长度无关。
16.根据前述权利要求之一所述的SPIM显微镜,其特征在于,将在x方向上被扫描的照明光束(5,14)在返回点处或其附近关闭,在该返回点处获得在x方向上的最大扫描长度。
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