[发明专利]一种用于检测VKORC1和CYP2C9基因多态性的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测VKORC1和CYP2C9基因多态性的引物，其包括以下引物对：

1）VKORC1第3外显子基因

上游引物序列为：5′- CAGTGCCTGAAGCCCACA -3 ′，

下游引物序列为： 5′- CTCACATGCCAAAGCAAAGC -3 ′ ；

2）CYP2C9第3外显子基因

上游引物序列为：5′- GCTGTTAAGGGAATTTGTAGG -3’，

下游引物序列为：5′- ATATTCACCCCAAGGCTGTCT -3’；

3）CYP2C9第7外显子基因

上游引物序列为：5′- GTGCCATTTTTCTCCTTTTCC -3’，

下游引物序列为：5′- AATGTCACAGGTCACTGCATG -3’。

2.一种利用基因测序方法检测VKORC1和CYP2C9基因多态性的试剂盒，其包括权利要求1所述的引物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于还包括以下试剂中的一种或多种：PCR反应液、阴性对照、阳性对照、PCR测序反应液、人外周血基因组提取试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括：10×PCR缓冲液、2.5~4.0 mM的MgCl₂、2U的Taq酶、0.2~0.4 mM的dNTPs、0.3~0.6 mM dUTP，所述引物溶于PCR反应液中，浓度为0.25 pmol/μl。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为去离子水。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为已知多态性人基因组DNA样品。

7.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR测序反应液包括：4 μl测序Buffer，1 μl作为测序引物的权利要求1所述引物。

8.根据权利要求3~7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述人外周血基因组提取试剂包括：去离子水，6M NaI，氯仿/异戊醇混合液，异丙醇和无水乙醇。