[发明专利]单链cDNA合成、微阵列用样品制备及核酸检测的方法

权利要求书

1.单链cDNA的合成方法，其包括：以从活体样品提取的RNA作为模板，使用有寡dT及启动子序列的引物合成单链cDNA的反应；其中

在合成单链cDNA的反应中，以终浓度500pM～500nM使用上述引物。

2.权利要求1所述的合成方法，其中上述活体样品是血液、淋巴液、尿、组织或细胞。

3.权利要求1所述的合成方法，其中

在合成单链cDNA的反应中，作为反应溶液中含的模板使用的RNA的浓度是0.005～0.5μg/μL。

4.微阵列用样品的制备方法，其包括：

从活体样品提取RNA的步骤；

使用含提取的RNA、以及，具有寡dT及启动子序列的引物的反应溶液，合成单链cDNA的步骤；及

以合成的cDNA作为模板合成检测用核酸，制备微阵列用样品的步骤；其中

在合成单链cDNA的步骤中，上述反应溶液中的上述引物的终浓度是500pM～500nM。

5.权利要求4所述的制备方法，其中

上述活体样品是血液、淋巴液、尿、组织或细胞。

6.权利要求4所述的制备方法，其中

在合成单链cDNA的步骤中，作为模板使用的RNA的浓度是0.005～0.5μg/μL。

7.权利要求4所述的制备方法，其中

在制备微阵列用样品的步骤中，检测用核酸是cRNA。

8.由微阵列的核酸的检测方法，其包括：

从活体样品提取RNA的步骤；

使用含提取的RNA、以及，具有寡dT及启动子序列的引物的反应溶液，合成单链cDNA的步骤；

以合成的cDNA作为模板合成检测用核酸，制备微阵列用样品的步骤；

使制备的微阵列用样品与微阵列接触，使微阵列用样品中含的检测用核酸和配置于微阵列的探针杂交的步骤；

测定由上述检测用核酸和上述探针的杂交发生的信号的步骤；及

基于测定结果，从上述微阵列用样品检测检测对象的核酸的步骤；其中

在合成单链cDNA的步骤中，合成单链cDNA的反应溶液中的上述引物的终浓度是500pM～500nM。

9.权利要求8所述的检测方法，其中

上述活体样品是血液、淋巴液、尿、组织或细胞。

10.权利要求8所述的检测方法，其中

在合成单链cDNA的步骤中，作为模板使用的RNA的浓度是0.005～0.5μg/μL。

11.权利要求8所述的检测方法，其中

在制备微阵列用样品的步骤中，检测用核酸是cRNA。