[发明专利]包结结晶法提取蛇床子中甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法

说明书

技术领域

本发明属于提取中草药中化学成分的方法领域，具体地涉及一种采用包结结晶法从蛇床子中提取甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法。

背景技术

蛇床子系伞形科蛇床（Cnidium monnieri (L.)Cuss.）的干燥成熟果实。具有散寒、祛风、燥湿、杀虫、止痒和壮阳等功效。国内外学者对其主要成分及其药理活性进行了广泛而深入的研究，特别是其对多种实验肿瘤有明显的抑制活性，引起了人们的普遍关注。蛇床子化学成分复杂，目前主要采用层析、色谱等分离方法提取，方法复杂。

因此提供一种方法简单，快速高效，能够分离出单一化学组分的方法是本领域技术人员急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种包结结晶法提取蛇床子中甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法。该方法操作简单，快速高效，不破坏目标化合物的结构，能实现从蛇床子中分离出单一化学组分。

本发明采用的技术方案是：包结结晶法提取蛇床子中甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法，包括如下步骤：

1）提取蛇床子粗提物；

2）包结物Ⅰ的制备：称取主体分子Ⅰ和蛇床子粗提物，加入苯使其溶解，然后加入石油醚，摇匀，放置析晶，抽滤，得滤液和晶体，滤液备用；晶体再用苯和石油醚重结晶，用石油醚洗涤，真空干燥得包结物Ⅰ；所述的主体分子Ⅰ是2，3-双(羟基二苯甲基)-1，4-二氧螺[4.5]癸烷，其结构式如下：

          主体分子Ⅰ

 3）提取甲氧基欧芹素：称取包结物Ⅰ置于圆底烧瓶中，串联上四个Kugelrohr瓶，送入管状炉，炉温控制240 oC，蒸馏，得到目标产物甲氧基欧芹素。

上述的包结结晶法提取蛇床子中甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法，还包括如下步骤：

4）包结物Ⅱ的制备：取第2）步骤得到的滤液，将苯和石油醚挥干，加入主体分子Ⅱ和乙醚，溶解，再加入石油醚，放置过夜，抽滤，得到絮状物，用乙醚-石油醚重结晶，得到晶体，洗涤，真空干燥得包结物Ⅱ；所述的主体分子Ⅱ是1，1，6，6-四苯基-2，4-己二炔-1，6-二醇，其结构式如下；

              主体分子Ⅱ

5）提取欧前胡素：取包结物Ⅱ置于锥形瓶中，加入丙酮，放置过夜，有无色透明块状晶体析出，移出该晶体，将剩余溶液蒸去丙酮，得到主要成分为欧前胡素的淡黄色晶体。

为进一步提纯欧前胡素，上述的包结结晶法提取蛇床子中甲氧基欧芹素和欧前胡素的方法还包括如下步骤：

6）欧前胡素的提纯：将步骤5）得到的主要成分为欧前胡素的淡黄色晶体溶于丙酮，用毛细管点于GF₂₅₄ 硅胶板上，用C₆H₆-EtOAc展开，在紫外灯下收集欧前胡素的谱带，用无水 MeOH 浸溶，过滤，浓缩，得欧前胡素。

本发明的有益效果是：本发明利用中草药中各化学成分的分子形状、大小（几何拓扑性质）、官能团的数量和位置（键力性质）的不同，采用“包结结晶法”，基于分子识别原理，通过选择主体分子对中草药中各化学成分（即客体分子）选择性识别，形成超分子包结物以结晶方式析出，从而实现单一化学组分的分离。这种方法操作简单，快速高效，不易破坏目标化合物的结构。本发明采用两种主体分子，即2，3-双(羟基二苯甲基)-1，4-二氧螺[4.5]癸烷(主体分子Ⅰ)和1，1，6，6-四苯基-2，4-己二炔-1，6-二醇（主体分子Ⅱ），成功的对蛇床子粗提物中的化学成分甲氧基欧芹素和欧前胡素进行了分步选择性包结分离，取得了良好的分离效果。结果表明主体分子Ⅰ对甲氧基欧芹素的选择分离纯度为99.3%，主体分子Ⅱ对欧前胡素的选择分离纯度为86.0%。采用本发明的方法，甲氧基欧芹素：按蛇床子粗提物加入量计算收率为 14.47 %，基于生药的收率为0.197 %；欧前胡素：按蛇床子粗提物加入量计算收率为5.56%，基于生药的收率为0.117%。

附图说明

图1是主体分子Ⅰ和包结物Ⅰ的X-射线粉末衍射比较图；

图中，a为主体分子Ⅰ；b为包结物Ⅰ。

图2是主体分子Ⅱ和包结物Ⅱ的X-射线粉末衍射比较图；

图中，a为主体分子Ⅱ；b为包结物Ⅱ。

图3是蛇床子粗提物的气相色谱图。

图4是包结物Ⅰ中分离出组分的气相色谱图。

图5是蛇床子粗提物的液相色谱图。

图6是包结物Ⅱ中分离出组分的液相色谱图。

图7是欧前胡素纯组分的液相色谱图。