[发明专利]微生物酶转化棘白菌素B的方法

权利要求书

1.将棘白菌素B转化成棘白菌素B母核的方法，包括以下步骤：

1)微生物发酵获得棘白菌素B脱酰酶；

2)发酵完成后，往发酵液中添加磷酸盐，进行超声，离心取上清液，即为棘白菌素B脱酰酶粗酶液；

3)纯化粗酶液，得到棘白菌素B脱酰酶酶液；

4)将棘白菌素B溶于乙醇中，与脱酰酶酶液混合并搅拌使其转化为棘白菌素B母核，转化完成后，过滤，取滤液；

5)滤液过大孔吸附树脂，棘白菌素B母核吸附于树脂上，用有机溶剂将棘白菌素B母核洗脱下来。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤1)中的发酵所用菌株为天然产酶菌或基因工程菌。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤1)中的发酵所用菌株为犹他游动放线菌(Actinoplanes utahensis)。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤2)所述超声持续1-2h。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤2)中往发酵液中添加磷酸盐，使得磷酸盐的浓度为0.05M-0.15M。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤2)中将所述发酵液的pH调节为6-7。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤3)所述纯化包括使粗酶液旋蒸浓缩并抽滤的步骤。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述步骤3)中所述旋蒸温度为45-50℃，旋蒸时间为1-2小时。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述步骤3)中所述浓缩为将体积减少至原体积的50-80％。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤4)中所述大孔吸附树脂选自HP20或XAD18。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤4)中所述转化时间为6-12小时。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤4)中所述乙醇的浓度为大于或等于95％。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤5)中所述有机溶剂为甲醇水溶液。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述甲醇水溶液的浓度为30-60％。

15.根据权利要求1所述的方法，其中上柱后脱酰酶酶液按步骤4)-5)可重复使用2-4次。