[发明专利]树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞在肺癌治疗中的应用

权利要求书

1.一种用于缓解或治疗肺癌的细胞组合，包括：

(a)致敏的DC细胞；该细胞如下制备：获取肺癌患者自身单个核细胞，在含 有GM-CSF和IL-4的条件下培养，用SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的肽刺激， 获得致敏的DC细胞；和

(b)CIK细胞；该细胞如下制备：获取肺癌患者自身单个核细胞，在含有IFN-γ 的条件下培养，之后加入抗人CD3抗体和IL-2，获得CIK细胞。

2.如权利要求1所述的细胞组合，其特征在于，(a)中，获取肺癌患者自身 单个核细胞后，所述的单个核细胞如下处理：将肺癌患者自身单个核细胞置于容 器中，静置使之形成两部分细胞，一部分黏附在容器壁上，一部分为悬浮细胞； 分离其中的黏附细胞；和/或

(b)中，获取肺癌患者自身单个核细胞后，所述的单个核细胞如下处理：将肺 癌患者自身单个核细胞置于容器中，静置使之形成两部分细胞，一部分黏附在 容器壁上，一部分为悬浮细胞；分离其中的非黏附细胞。

3.如权利要求1所述的细胞组合，其特征在于，(a)中，单个核细胞在含 有1000±200单位/mL GM-CSF，500±100单位/mL IL-4的培养介质中培养。

4.如权利要求1所述的细胞组合，其特征在于，(a)中，细胞在含有GM-CSF 和IL-4的条件下培养6-10天后，与SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的肽共孵育 12±2小时。

5.如权利要求1所述的细胞组合，其特征在于，(b)中，单个核细胞在含有 1000±100单位/mL IFN-γ的培养介质中培养24±5小时，之后加入50±10 ng/mL的抗CD3抗体，细胞每3±1天换液，换液时补充1000±200单位/mL IL-2，培养9±2天。

6.一种制备致敏的DC细胞的方法，该方法包括：获取肺癌患者自身单个 核细胞，在含有GM-CSF和IL-4的条件下培养，用SEQ ID NO：1所示氨基酸 序列的肽刺激，获得致敏的DC细胞。

7.一种制备CIK细胞的方法，该方法包括：获取肺癌患者自身单个核细胞， 在含有IFN-γ的条件下培养，之后加入抗CD3抗体和IL-2，获得CIK细胞。

8.权利要求1所述的细胞组合的用途，用于制备缓解或治疗肺癌的组合物。

9.一种用于缓解或治疗肺癌的药盒，其中包括：

容器1，其中包括：有效量的致敏的DC细胞，以及与所述细胞相容的载体； 所述的致敏的DC细胞如下制备：获取肺癌患者自身单个核细胞，在含有GM-CSF 和IL-4的条件下培养，用SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的肽刺激，获得致敏 的DC细胞；和/或

容器2，其中包括：有效量的CIK细胞，以及与所述细胞相容的载体；所述 的CIK细胞如下制备：获取肺癌患者自身单个核细胞，在含有IFN-γ的条件下培 养，之后加入抗CD3抗体和IL-2，获得CIK细胞。

10.如权利要求9所述的药盒，其特征在于，其中还包括癌症化疗药物。