[发明专利]一种调节脂代谢的蛋白及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物制药；更具体地，本发明涉及一种调节脂代谢的蛋白及其应用。

背景技术

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)会引起许多肝脏慢性疾病，如肝硬化、肝癌和肝脏衰竭(1-3)。NAFLD的发生与年龄，二型糖尿病和高血脂相关(4)。肝脏脂肪化是NAFLD的早期症状，它的发生也是和年龄、二型糖尿病和高血脂相关的(5，6)。小鼠随着年龄增长或者在高脂食物喂养情况下都会发生肝脏脂肪化(7)。甘油三酯在肝脏中的过度积累会导致肝脏脂肪化，其中的机制包括：增加的脂肪摄入、增强的脂肪合成和脂肪氧化及肝脏脂肪向外输出的减少(8)。

脂代谢能够被许多转录后修饰所调控，如：磷酸化、泛素化和乙酰化(9，10)。蛋白的乙酰化修饰已经成为调控细胞代谢的一种非常重要的转绿后修饰(11)，同时乙酰化是一个动态的过程，这个过程受乙酰化酶和去乙酰化酶所调控。SIRT1是一个NAD+依赖的去乙酰化酶，在肝脏中敲除SIRT1会影响脂肪酸氧化造成肝脏脂肪化(12)。肝脏特异性敲除另一个去乙酰化酶SIRT6会增加糖原和甘油三酯的合成从而形成脂肪肝(13)。乙酰化酶也参与了许多的脂代谢过程。SREBP是脂代谢中关键的调控因子，有报导发现乙酰化酶p300能够乙酰化SREBP从而增加它的稳定性(14，15)。另外的报导发现，p300还可以乙酰化脂代谢的另一个关键的调控因子PPARγ(16)。乙酰化酶GCN5被报导能够乙酰化PGC-1β从而抑制它的下游参与脂代谢的基因的表达(17)。乙酰化酶PCAF被发现能够乙酰化并增强β-catenin的稳定性(18)，而β-catenin可以影响脂代谢和肝脏中甘油三酯的浓度(19)。虽然一些乙酰化酶被发现参与脂代谢的调控，但参与肝脏脂代谢的乙酰化酶还需要更多的研究。

蛋白乙酰基转移酶-1(Patt1)是本实验室克隆并鉴定的一个新的乙酰化酶，它属于GNAT(GCN5 related N-acetyltransferase)family，同时Patt1在肝脏中是高表达的(20)。但是，以往它在肝脏中的作用还不清楚。

发明内容

本发明的目的在于提供一种调节脂代谢的蛋白及其应用。

在本发明的第一方面，提供蛋白乙酰基转移酶-1(Protein acetyltransferase-1，Patt1)的下调剂的用途，用于制备改善肝脏脂代谢的组合物。

在一个优选例中，所述的组合物还用于：缓解或治疗脂肪肝，缓解年龄相关的肝脏脂肪化，降低体脂肪含量，增加瘦体重，增强葡萄糖耐受能力，降低肝脏脂肪含量，减少肝脏中年龄相关的甘油三酯含量，降低低密度脂蛋白-胆固醇含量，减弱肝细胞脂肪酸摄取能力，降低肝脏中CD36基因的表达，降低肝脏中PPARγ的表达，降低肝脏中ACL基因的表达，降低肝脏中FAS基因的表达，降低肝脏中ELOVL6基因的表达，上调ACC蛋白磷酸化水平，降低肝脏中ACC的活性，减弱体内脂肪合成，上调CPT-1蛋白的表达和活性，提高肝脏ATP水平和/或提高脂肪酸氧化能力。

在另一优选例中，所述的蛋白乙酰基转移酶-1的下调剂选自(但不限于)：

特异性干扰蛋白乙酰基转移酶-1的编码基因表达的干扰分子；或

特异性与蛋白乙酰基转移酶-1结合的结合分子(如能够抑制蛋白乙酰基转移酶-1活性的抗体或配体)。

在另一优选例中，所述的干扰分子选自(但不限于)：反义核酸、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA；或能表达或形成所述反义核酸、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA的构建物。

在另一优选例中，所述的干扰分子是小干扰RNA(siRNA)，其序列具有18-22bp的序列长度，且能够与蛋白乙酰基转移酶-1的mRNA互补并导致蛋白乙酰基转移酶-1的表达被下调。

在另一优选例中，所述的干扰分子具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供一种用于改善肝脏脂代谢的小干扰RNA分子，所述的小干扰RNA分子是：

(a)具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示核苷酸序列的小干扰RNA分子；和/或

(b)核苷酸序列与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示核苷酸序列互补的小干扰RNA分子。

在本发明的另一方面，提供一种用于改善肝脏脂代谢的组合物，所述的组合物含有：

(1)有效量的所述的小干扰RNA分子；和