[发明专利]一株纤维素酶产生菌株P5的制备和应用

权利要求书

1.一株纤维素酶产生菌株P5，其特征在于：所述菌株在中国普通微生物保藏管理中心的保藏号为：CGMCC NO.5356；分类命名为Pantoea ananatis，菌株的 16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所述。

2.如权利要求1所述的一株纤维素酶产生菌株P5的制备方法是，其特征在于：

（1）从腐烂植物枝叶表面及附近的土壤中分离样品，样品加入50 mLLB培养基中，在250 mL锥形瓶中,以160 rpm转速于37°C培养24 h涂布于LB固体平板上，获得菌株;所述LB液体培养基组分为：每1L蒸馏水中含有蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g；所述LB固体平板组分为：每1L蒸馏水中含有蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g琼脂粉12g；

（2）将菌落接种到产纤维素酶菌株筛选培养基，于培养温箱中培养2-4 d，筛选纤维素酶的产生菌，所用的培养基为：每1L培养基中含有羧甲基纤维素钠10 g，蛋白胨10g，酵母粉5 g，KH₂PO₄ 1 g，MgSO₄ 0.2 g，NaCl 10 g，葡萄糖2 g，琼脂粉12 g，以蒸馏水补足体积至1L；

（3）将0. 5%的刚果红倒入接种培养后的产纤维素酶菌株筛选培养基中染色5 min，倒掉刚果红后，使用5%的NaCl溶液浸泡脱色1h，筛选获得产纤维素酶菌株。

3.如权利要求1所述一株纤维素酶产生菌株P5的16S rDNA序列获得方法是：对菌株16S rDNA基因克隆和序列分析；用于克隆细菌16S rDNA基因的通用上游引物序列为：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG, 通用下游引物序列为：GGTTACCTTGTTACGAC TT。

4.如权利要求1所述纤维素酶产生菌株P5的应用，其特征在于：所述纤维素酶产生菌株P5应用于生产纤维素酶。