[发明专利]一种检测转基因植物成分的重组质粒及其应用

权利要求书

1.一种检测转基因植物成分的重组质粒，该质粒包括载体和基因片段，其特征在于，所述的基因片段由叶绿体RBCL基因的特异性序列、CaMV35S启动子特异性序列和NOS终止子的特异性序列融合构成，其中，

所述的叶绿体RBCL基因的特异性序列如SEQ ID NO.1所示；

所述的CaMV35S的特异性序列如SEQ ID NO.2所示；

所述的NOS终止子的特异性序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述的基因片段是以转基因大豆GTS40-3-2为原料并采用下述引物对扩增得到：

(I)扩增叶绿体基因RBCL的特异性序列的引物对：

上游引物：5’-AATCTTCTACTGGTACATGGAC-3’，

下游引物：5’-GCCACCGGATCCACCGCCACCTCATCATCTTTGGTAAAATCAAG-3’；

(II)扩增35S启动子基因CaMV35S的特异性序列的引物对：

上游引物：5’-GGTGGCGGTGGATCCGGTGGCGCTCCTACAAATGCCATCA-3’，

下游引物：5’-CAAGACCGGCAACAGGATTCGATAGTGGGATTGTGCGTCA-3’；

(III)扩增终止子基因NOS的特异性序列的引物对：

上游引物：5’-TGACGCACAATCCCACTATCGAATCCTGTTGCCGGTCTTG-3’，

下游引物：5’-TTATCCTAGTTTGCGCGCTA-3。

3.一种快速检测转基因植物成分的多重PCR试剂盒，该试剂盒由引物、DNA聚合酶、PCR反应液和阳性对照品组成，其特征在于，

所述的阳性对照品为权利要求1所述的重组质粒；

所述的引物分别为：

(A)扩增叶绿体基因RBCL特异性序列的引物对：

上游引物：5’-TGTGGACCGATGGGCTTAC-3’，

下游引物：5’-TGAGGCGGACCTTGGAAAG-3’；

(B)扩增转基因植物成分CaMV35S启动子特异性序列的引物对：

上游引物：5’-GCTCCTACAAATGCCATCA-3’，

下游引物：5’-GATAGTGGGATTGTGCGTCA-3’；

(C)扩增转基因植物成分NOS终止子特异性序列的引物对：

上游引物：5’-ATCCTGTTGCCGGTCTTG-3’，

下游引物：5’-GTATAATTGCGGGACTCTAATC-3’。