[发明专利]一种嗜盐曲霉菌F1及其应用有效
申请号: | 201110356217.2 | 申请日: | 2011-11-11 |
公开(公告)号: | CN102559510B | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 林秀坤;肖琳;吴宁;刘明;刘海洲;魏鉴腾;赵进;王惠;王凤霞;郭颖 | 申请(专利权)人: | 中国科学院海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P17/18;C07D491/20;C12R1/66 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李颖 |
地址: | 266071*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 曲霉 f1 及其 应用 | ||
1.一种嗜盐曲霉菌F1,其特征在于:嗜盐曲霉菌F1(Aspergillus sp. F1),保藏于中国典型培养物保藏中心(中国武汉大学内),保藏号为: CCTCC NO:M 2011277,保藏日期为:2011年8月4日。
2.一种按权利要求1所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:将 所述嗜盐曲霉菌F1发酵培养于F1的液体发酵培养基中发酵培养,所得发 酵物经纯化分离即得到细胞松弛素类化合物Rosellichalasin和 Cytochalasin E。
3.按权利要求2所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:将所述 嗜盐曲霉菌F1发酵培养于F1的液体发酵培养基中于28-30℃静止发酵培养 25-30天所得发酵物经纯化分离即得到细胞松弛素类化合物 Rosellichalasin和Cytochalasin E。
4.按权利要求2或3所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:所述 发酵物经纯化分离为将发酵培养后的发酵物的菌丝体和发酵液过滤分离, 将菌丝体用其2倍体积乙醇浸提4-5次,再用过量的乙酸乙酯萃取10-15 次,将乙酸乙酯萃取液减压浓缩,得粗浸膏,然后采用硅胶柱层析、重结 晶和Sephadex LH-20凝胶柱层分离纯化,即分别得到Rosellichalasin和 Cytochalasin E。
5.按权利要求4所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:将所述浸 膏用乙酸乙酯溶剂溶解后,加200-300目硅胶搅拌,减压除去溶剂后,用 硅胶柱层析,以石油醚-乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱,收集石油醚-乙酸 乙酯比例为2∶1(v/v)洗脱液,经TLC检测收集Rf=0.575组分,洗脱组分减 压浓缩至干,再在正己烷-乙酸乙酯比例为1∶1(v/v)中重结晶,收集无色 针状晶体Rosellichalasin;
或收集石油醚-乙酸乙酯比例为1∶2(v/v)洗脱液,经TLC检测收集 Rf=0.35组分,洗脱组分减压浓缩至干,再在己烷-丙酮比例为1∶1中重结 晶,收集无色针状晶体Cytochalasin E;
将上述所得无色针状晶体分别经Sephadex LH-20柱层析,用甲醇洗脱, 洗脱液减压浓缩至干,分别得白色无定形物。
6.按权利要求5所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:所述石 油醚-乙酸乙酯梯度为100∶0-0∶100(v/v);正己烷-乙酸乙酯比例为1∶1 (v/v);己烷-丙酮比例为1∶1(v/v)。
7.按权利要求2或3所述的嗜盐曲霉菌F1的应用,其特征在于:所 述嗜盐曲霉菌F1的液体发酵培养基成分为:葡萄糖2.0%(W/V),海盐 6.0%(W/V),马铃薯200克,加适量水煮沸30分钟,4层纱布过滤,滤液用 蒸馏水定容至1升。
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